应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 提取动物组织RNA时的处理
131/2返回列表12下一页
查看: 2758  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

ljapril

新虫 (初入文坛)

[求助] 提取动物组织RNA时的处理

我要从小鼠脑部的海马提取RNA，现在组织已经有了，放在1.5ml的EP管中，只有一点点，提取RNA时需要充分研磨破碎，我们这里只有细胞超生破碎仪，那么我这种情况可以用吗?
一是超生破碎放热，会影响RNA吗？
二是探头该怎么处理啊？用DEPC水冲洗？会不会很容易污染样品？
三是大概要破碎多久呢？设定的参数最好是多少啊？怎么判断破碎充分了呢？
问题有点多，谢谢大家了！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-05-16 22:46:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖置顶 ( 共有1个 )

ljapril

新虫 (初入文坛)
西瓜: 回帖置顶 2012-05-24 09:02:17
引用回帖:
3楼: Originally posted by longrna at 2012-05-17 09:01:13:
脑部？应该是很容易裂解的组织。加入Trizol后用枪反复吸打多次即可裂解。可见组织均匀分散在Trizol里即已裂解，也可在吹散后静置上5-10min确保裂解。
超声也不是不可以，但相对来说麻烦。且超声放热多少对RNA有些影

脑部的组织其实并不容易裂解哦，大概有些特殊的物质吧，容易裂解的是肝脏组织，很容易就分散了。
赞一下 回复此楼
9楼2012-05-23 23:53:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

karin

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-05-17 14:45:14
ljapril: 金币+1 2012-07-19 10:25:21
没有用超声破碎过动物组织，破碎过大肠杆菌。不清楚用超声能不能破碎，应该用液氮研磨比较好。要是可以用超声的话，可以把ep管放在冰上。与组织接触的仪器部分都要认真处理吧，要不会是RNA降解的。
祝好运啊！
赞一下 回复此楼
坚持就是胜利
2楼2012-05-17 08:43:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

longrna

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-05-17 14:45:25
ljapril: 金币+2 2012-07-19 10:25:33
脑部？应该是很容易裂解的组织。加入Trizol后用枪反复吸打多次即可裂解。可见组织均匀分散在Trizol里即已裂解，也可在吹散后静置上5-10min确保裂解。
超声也不是不可以，但相对来说麻烦。且超声放热多少对RNA有些影响。且如是接触式的探头，容易引入污染。
赞一下 回复此楼
伟大航线....
3楼2012-05-17 09:01:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ljapril

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by karin at 2012-05-17 08:43:48:
没有用超声破碎过动物组织，破碎过大肠杆菌。不清楚用超声能不能破碎，应该用液氮研磨比较好。要是可以用超声的话，可以把ep管放在冰上。与组织接触的仪器部分都要认真处理吧，要不会是RNA降解的。
祝好运啊！

1.5的EP管怎么放液氮进去啊？组织就那么一点点，也不好取出来啊
赞一下 回复此楼
4楼2012-05-17 11:50:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ljapril

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by longrna at 2012-05-17 09:01:13:
脑部？应该是很容易裂解的组织。加入Trizol后用枪反复吸打多次即可裂解。可见组织均匀分散在Trizol里即已裂解，也可在吹散后静置上5-10min确保裂解。
超声也不是不可以，但相对来说麻烦。且超声放热多少对RNA有些 ...

用枪吹打害怕裂解的不够充分，那样不是就不好提取RNA了吗？哎，现在还纠结啊
赞一下 回复此楼
5楼2012-05-17 11:52:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain
液氮
回复此楼
我的路靠我的脚踩出来！！！不走寻常路！！！
6楼2012-05-17 14:37:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

karin

木虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ljapril at 2012-05-17 11:50:42:
1.5的EP管怎么放液氮进去啊？组织就那么一点点，也不好取出来啊

我以前也用1.5的ep管，就有镊子夹着管子伸到液氮里，把液氮灌点在管子里，立即研磨的。我提的昆虫组织的，用专门的小研磨棒。
赞一下 回复此楼
坚持就是胜利
7楼2012-05-17 15:05:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

longrna

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助，欢迎交流 2012-05-24 13:45:09
ljapril: 金币+2 2012-07-19 10:25:54
引用回帖:
5楼: Originally posted by ljapril at 2012-05-17 11:52:59:
用枪吹打害怕裂解的不够充分，那样不是就不好提取RNA了吗？哎，现在还纠结啊

裂解细胞膜不是靠吹打，是靠化学试剂（Trizol里的酚）。吹打只是把大团组织块吹散以便裂解。所以大可不必担心。
另外，那么少的组织如果用研磨损失的估计比剩余的还多。
另外axygen有一种叫做研磨棒的东西，与进口1.5ml离心管配合使用也可进行“研磨”操作。个人经验如果是易散易吹打的组织（如脑）还不如直接吹打。
赞一下 回复此楼
伟大航线....
8楼2012-05-17 15:49:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ljapril

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by karin at 2012-05-17 15:05:46:
我以前也用1.5的ep管，就有镊子夹着管子伸到液氮里，把液氮灌点在管子里，立即研磨的。我提的昆虫组织的，用专门的小研磨棒。

我试了用加液氮研磨，发现组织变得好硬，不好磨啊
赞一下 回复此楼
10楼2012-05-23 23:54:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 ljapril 的主题更新
131/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 岩土工程学报什么时候才能终审完呐 25+3 yeager111 2026-08-10 4/200 2026-08-16 20:42 by tfang
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 6/300 2026-08-16 20:07 by 奶牛小黑
[基金申请] 快农历七夕节了，轻松一下，男人悄悄话，女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[基金申请] 有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验） +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[基金申请] filecode +8 cratir 2026-08-14 12/600 2026-08-15 18:08 by zyfgau
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊 +12 Tide man 2026-08-10 13/650 2026-08-15 16:34 by 氺木
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥？ +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了，巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭