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革兰氏阳性菌感受态的制备及转化
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淡竹2066
铜虫
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虫号: 967802
[交流]
革兰氏阳性菌感受态的制备及转化
前段时间构建好一个质粒要电转入链球菌中,但是转了好几批都没有获得转化子,然后不断的找问题源,也重新做了感受态,试了不同的电转仪也还是不行。有没有哪位前辈有做过这方面的研究,给分析一下。没做过的也可以一起交流交流。
质粒已经经过验证了是构建正确了的。
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2012-05-03 15:25:53
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hugp_2007
铜虫
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淡竹2066(金币+1): 谢谢参与
我做芽孢杆菌的GFP转化,质粒是pCM20,转了好几次,都没有进去,换了好几个电击仪了,求高人指点!
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9楼
2012-10-07 21:26:50
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bonbonzd
木虫
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虫号: 1232461
★
淡竹2066(金币+1): 谢谢参与
链霉菌可尝试在制作感受态时,加点溶菌酶处理,溶菌酶浓度,作用时间自己摸索,
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淡竹2066
2楼
2012-05-03 22:41:27
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淡竹2066
铜虫
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2楼
:
Originally posted by
bonbonzd
at 2012-05-03 22:41:27:
链霉菌可尝试在制作感受态时,加点溶菌酶处理,溶菌酶浓度,作用时间自己摸索,
加入溶菌酶以后会不会对菌体有影响呢?溶菌酶不是会破坏细胞壁吗?
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淡竹2066
3楼
2012-05-04 09:59:50
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蜕化
新虫
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★
淡竹2066(金币+1): 谢谢参与
最近几天也在干这事,转了好几次都没成功,其实就那几个步骤找不到什么原因,很郁闷呀
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4楼
2012-05-04 20:38:47
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