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淡竹2066

铜虫 (小有名气)

[交流] 革兰氏阳性菌感受态的制备及转化

前段时间构建好一个质粒要电转入链球菌中，但是转了好几批都没有获得转化子，然后不断的找问题源，也重新做了感受态，试了不同的电转仪也还是不行。有没有哪位前辈有做过这方面的研究，给分析一下。没做过的也可以一起交流交流。
质粒已经经过验证了是构建正确了的。
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1楼 2012-05-03 15:25:53
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淡竹2066

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 蜕化 at 2012-05-04 20:38:47
最近几天也在干这事，转了好几次都没成功，其实就那几个步骤找不到什么原因，很郁闷呀

转了一个月终于成功了！
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8楼2012-06-05 09:53:55
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bonbonzd

木虫 (小有名气)
★
淡竹2066(金币+1): 谢谢参与
链霉菌可尝试在制作感受态时，加点溶菌酶处理，溶菌酶浓度，作用时间自己摸索，
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淡竹2066
2楼2012-05-03 22:41:27
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普通回帖

淡竹2066

铜虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by bonbonzd at 2012-05-03 22:41:27:
链霉菌可尝试在制作感受态时，加点溶菌酶处理，溶菌酶浓度，作用时间自己摸索，

加入溶菌酶以后会不会对菌体有影响呢？溶菌酶不是会破坏细胞壁吗？
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淡竹2066
3楼2012-05-04 09:59:50
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蜕化

新虫 (初入文坛)
★
淡竹2066(金币+1): 谢谢参与
最近几天也在干这事，转了好几次都没成功，其实就那几个步骤找不到什么原因，很郁闷呀
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4楼2012-05-04 20:38:47
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淡竹2066

铜虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 淡竹2066 at 2012-05-04 09:59:50:
加入溶菌酶以后会不会对菌体有影响呢？溶菌酶不是会破坏细胞壁吗？

那你也加油哦，我也还在继续电转中。。。
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5楼2012-05-04 21:04:26
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淡竹2066

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 淡竹2066 at 2012-05-04 09:59:50:
加入溶菌酶以后会不会对菌体有影响呢？溶菌酶不是会破坏细胞壁吗？

那你也加油哦，我也正在继续电转中。。。
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6楼2012-05-04 21:06:21
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xzx018

铁杆木虫 (著名写手)
★
淡竹2066(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
2楼: Originally posted by bonbonzd at 2012-05-03 22:41:27:
链霉菌可尝试在制作感受态时，加点溶菌酶处理，溶菌酶浓度，作用时间自己摸索，

人家说的是链球菌，不是链霉菌啦。。。。。假如是链霉菌，经典的方法不是做原生质体转化么
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7楼2012-05-06 11:17:16
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hugp_2007

铜虫 (初入文坛)
★
淡竹2066(金币+1): 谢谢参与
我做芽孢杆菌的GFP转化，质粒是pCM20,转了好几次，都没有进去，换了好几个电击仪了，求高人指点！
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9楼2012-10-07 21:26:50
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tsllts

铁虫 (初入文坛)
★
淡竹2066(金币+1): 谢谢参与
我做布鲁氏菌的电转化 一直获得不到转化子 好几个月了 揪心呐
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10楼2012-10-07 22:49:28
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syyjoy

新虫 (初入文坛)
★
淡竹2066(金币+1): 谢谢参与
现在怎么样啊   我最近在做   想请教你一下  嘿嘿
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11楼2014-07-09 08:45:00
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周志惠

新虫 (小有名气)
★
淡竹2066(金币+1): 谢谢参与
楼主，有没有制备链球菌感受态细胞的方法或步骤啊？如果有，麻烦发我一下，我目前也在做
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12楼2015-08-19 10:44:10
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冷雁孤旅

木虫 (著名写手)
★
淡竹2066(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
8楼: Originally posted by 淡竹2066 at 2012-06-05 09:53:55
转了一个月终于成功了！...

楼主给大家分享一下你的经验呗  谢谢你了
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13楼2015-08-19 12:45:38
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LIN琳LIN

新虫 (初入文坛)
★
淡竹2066(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
8楼: Originally posted by 淡竹2066 at 2012-06-05 09:53:55
转了一个月终于成功了！...

请问能传授一下经验么
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14楼2017-03-29 10:02:20
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远飞的鸟儿

新虫 (初入文坛)
★
淡竹2066(金币+1): 谢谢参与
求成功方法

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15楼2017-04-05 17:19:30
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