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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 文库构建所用感受态——超级感受态？？
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awenrou

木虫 (小有名气)

[求助] 文库构建所用感受态——超级感受态？？

最近要做文库的构建，可是普通的BL21感受态转化效率太低，大家都用什么样的感受态？
有同学提到超级感受态制备试剂盒，大家有没有经验哪个公司的效果好？
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1楼 2012-08-16 15:09:20
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bragren123

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
Takara的效果不错，我们一直用
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2楼2012-08-16 15:30:24
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awenrou

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bragren123 at 2012-08-16 15:30:24
Takara的效果不错，我们一直用

是Takara的感受态还是制备试剂盒？
你也做文库构建吗?
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3楼2012-08-16 15:59:26
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gelois

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 鼓励交流经验 2012-08-17 13:49:17
一般的感受态都用invitrogen的，转化效率很高，质量比较不错。
也用过天根和康维的，天根的话一般般，康维的不行。天根的感受态转化效率还可以，但是质量不是很好，一袋感受态大概有3-5支感受态是不能用的，死的。而且还有可能会带入噬菌体，很坑。
最近实验室开始用全式金的抗噬菌体的感受态了，感觉还不错~

至于制备感受态，我们都没有用过试剂盒，都是自己直接做的，转化效率真心很低。。。。
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4楼2012-08-16 16:30:49
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awenrou

木虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by gelois at 2012-08-16 16:30:49
一般的感受态都用invitrogen的，转化效率很高，质量比较不错。
也用过天根和康维的，天根的话一般般，康维的不行。天根的感受态转化效率还可以，但是质量不是很好，一袋感受态大概有3-5支感受态是不能用的，死的。 ...

谢谢！可是最近买不到invitrogen的了，感受态买不到进口的。
我们实验室DH5a用的都是全式金，但是BL21没有用过。我是连接产物直接转BL21，建库用，希望转化率高一些。你们做建库也用全式金的BL21吗？
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5楼2012-08-16 18:46:27
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gelois

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-17 13:49:39
引用回帖:
5楼: Originally posted by awenrou at 2012-08-16 18:46:27
谢谢！可是最近买不到invitrogen的了，感受态买不到进口的。
我们实验室DH5a用的都是全式金，但是BL21没有用过。我是连接产物直接转BL21，建库用，希望转化率高一些。你们做建库也用全式金的BL21吗？...

额……没做过文库构建。。。。不过之前用作原核表达的感受态，我们用的就是invitrogen和天根的。全式金也是最近因为噬菌体比较严重才开始用的。
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6楼2012-08-17 08:28:29
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indica

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by gelois at 2012-08-17 08:28:29
额……没做过文库构建。。。。不过之前用作原核表达的感受态，我们用的就是invitrogen和天根的。全式金也是最近因为噬菌体比较严重才开始用的。...

很想知道噬菌体严重是什么状况? 表现出来是什么样的, 细胞裂解还是说菌落形态有变化?,谢谢
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7楼2013-03-14 22:23:17
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子非鱼ys

铁虫 (初入文坛)
楼主问题最后是怎么解决的？我构文库转BL21DE3也是一个都没长
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8楼2017-07-03 15:55:48
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