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consist10

金虫 (正式写手)

[求助] GST亲和纯化 分子伴侣去除 问题

亲们好。现在实验遇到瓶颈,急求大家的热心帮助。
HPV L1 蛋白通过PGEX-4T-1载体原核可溶性表达后,进行GST亲和纯化,得到如图所示的一条82kD的融合蛋白带和一条60KD GroEL 分子伴侣带,另外,按照文献提示用ATP,Mgcl2处理分子伴侣后用3.5M尿素作用,此时可见有絮状沉淀析出,并且随着尿素加入的增多,沉淀也增多。离心后去上清进行透析,透析液为PBS,条件是4度,但30分钟内就出现了大量的沉淀。请教亲们这条分子伴侣带如何去除,急求,谢啦。
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西瓜: 金币+1, 鼓励应助! 2012-04-20 23:04:27
consist10: 金币+3, 有帮助 2012-04-21 20:21:45
这就是不同分子量的蛋白质的非变性分离呀。。。用分子筛层析即可呀。
2楼2012-04-20 22:04:06
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