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consist10金虫 (正式写手)
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[求助]
GST亲和纯化 分子伴侣去除 问题
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亲们好。现在实验遇到瓶颈，急求大家的热心帮助。 HPV L1 蛋白通过PGEX-4T-1载体原核可溶性表达后，进行GST亲和纯化，得到如图所示的一条82kD的融合蛋白带和一条60KD GroEL 分子伴侣带，另外，按照文献提示用ATP，Mgcl2处理分子伴侣后用3.5M尿素作用，此时可见有絮状沉淀析出，并且随着尿素加入的增多，沉淀也增多。离心后去上清进行透析，透析液为PBS，条件是4度，但30分钟内就出现了大量的沉淀。请教亲们这条分子伴侣带如何去除，急求，谢啦。  |
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凌波丽
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2楼2012-04-20 22:04:06