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consist10

金虫 (正式写手)

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[求助] GST亲和纯化分子伴侣去除问题

亲们好。现在实验遇到瓶颈，急求大家的热心帮助。
HPV L1 蛋白通过PGEX-4T-1载体原核可溶性表达后，进行GST亲和纯化，得到如图所示的一条82kD的融合蛋白带和一条60KD GroEL 分子伴侣带，另外，按照文献提示用ATP，Mgcl2处理分子伴侣后用3.5M尿素作用，此时可见有絮状沉淀析出，并且随着尿素加入的增多，沉淀也增多。离心后去上清进行透析，透析液为PBS，条件是4度，但30分钟内就出现了大量的沉淀。请教亲们这条分子伴侣带如何去除，急求，谢啦。

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1楼 2012-04-20 21:48:27

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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

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专业: 生物大分子结构与功能
管辖: 生物科学综合

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+1, 鼓励应助！ 2012-04-20 23:04:27
consist10: 金币+3, ★有帮助 2012-04-21 20:21:45

这就是不同分子量的蛋白质的非变性分离呀。。。用分子筛层析即可呀。

2楼2012-04-20 22:04:06

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