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lanhuaorchid金虫 (著名写手)
orchid
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[求助]
有关定量PCR，急急急
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最近做了好久的定量ＰＣＲ，耗费了不少试剂，但没什么结果，求助…… 我是在文献里面找的引物，在普通ＰＣＲ仪上扩的很好，也摸了退火温度的，特异性也挺好的，扩增片段１００－３００之间，但在ＱＰＣＲ仪（伯乐的ＣＦＸ９６）扩增曲线很不好，要么就是只有最高的几个浓度有信号，要么就是Ｃｔ值基本都大于３０，改变退火温度也没有好转，也尝试了改为３步法，没有好转，但从头至尾熔解曲线都较好，想问问群里的大侠，有没有做这方面精通的，望能指点一二，实验各种悲剧呀  ，急急急还有同学的定量ＰＣＲ会出现这样的曲线（不好选择ｔｈｒｅｓｈｏｌｄ），求解释  定量ＰＣＲ扩增曲线 |
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 【分子生物】EPI帖 |
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感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币-100, 广告！ 2012-03-27 19:16:51
西瓜: 编辑内容 2012-04-02 11:14
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3楼2012-03-27 16:31:15
atlanticwi
金虫 (正式写手)
琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
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西瓜: 金币+1, 鼓励交流 2012-03-28 10:14:23
西瓜: 金币+1, 鼓励交流 2012-03-28 10:14:23
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嗯............. Bio-Rad 的CFX本人非常讨厌，有很较强的边缘效应（我本人也对伯乐的东西有偏见、抱歉） 请问你这个做的是标曲吗？有详细内容了我们才方便参谋参谋  |
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lanhuaorchid2楼2012-03-27 16:19:08
lanhuaorchid
金虫 (著名写手)
orchid
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4楼2012-03-27 19:10:53
lanhuaorchid
金虫 (著名写手)
orchid
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5楼2012-03-27 19:15:29
10