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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 有关定量PCR，急急急
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
西瓜: 金币+5, MolEPI+1, Good！ 2012-03-28 10:16:18
引用回帖:
5楼: Originally posted by lanhuaorchid at 2012-03-27 19:15:29:
另外，请问，边缘效应是指？

嗯...........
1. 阙值还是不要手动调整了好，一般机子自行设定的都是比较可靠的，你若没有一定的定量知识就不要手动调整。你也可选择输出实验结果的荧光值，按照LinRegPCR软件计算后进行Ct矫正输出，不过这里只是针对相对定量的应用。
2. 边缘效应是指机子的温度控制越到靠边的行或排就越控制不准，偶用CFX96（学校的新机），每次最右边一列就毛都扩不出来，内参也一样，其他都能正常扩增。
3. 按你说的有调出5cycle有信号的这种，基本是不可能出现的，因为一般的Ct在20到35左右才是正常情况。
4. 你自己实验中说的按照文献的引物来做，但还包括反转录、试剂等等各方面的差异因素，不能说就一定重复出来，这个范围太广，不好提出建议
希望有所帮助
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Let God do with it as He wills
6楼2012-03-27 20:18:53
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