24小时热门版块排行榜    

查看: 2528  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

baby1_9253344

金虫 (小有名气)

[求助] 求鉴定PCR扩增电泳图

如图,扩增小片段(200多bp),0为空白,1到7为样品,右边俩位markerDL2000。
不是生物专业的,不晓得这算扩增出来了吗?
还有,最上面的那个应该是引物二聚体吗(0号样品也有的那个条带)?
如果要胶回收,切胶的时候要把拖尾的部分也切了吗?
如果要切胶回收,用EB染色紫外光下切,不能超过多久?(怕紫外照久了突变)

门外汉。。。问题比较多。。。谢谢大家了!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huangk1199

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
baby1_9253344(金币+1): 2012-03-14 14:10:31
1.拖尾严重,适当提高退火温度,减少循环次数。
2.二聚体严重,建议减少引物的浓度,酶保护剂BSA之类的有必要添加。
3.建议你把你的PCR条件晒晒,大家好做具体分析。
一路蚯蚓
6楼2012-03-14 14:05:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
baby1_9253344(金币+1): 2012-03-13 23:15:31
这点用质量也太差了,marker都这么模糊
1. 0空白是什么,没有模板么,还是没有引物,还是怎么的?
2. 我想说,这很可能不是你要的带的。你跑小片段的时候,胶浓度高点,2%或许可能更好些
3. 紫外下切割要不了多长时间吧,一般没事的,毕竟一般切胶的紫外强度不会很大的,尽量快些就好了。
4.小片段有时候不是很好回收,找个适合小片段的试剂盒
几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
2楼2012-03-13 22:08:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

baby1_9253344

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by fungixx at 2012-03-13 22:08:23:
这点用质量也太差了,marker都这么模糊
1. 0空白是什么,没有模板么,还是没有引物,还是怎么的?
2. 我想说,这很可能不是你要的带的。你跑小片段的时候,胶浓度高点,2%或许可能更好些
3. 紫外下切割要不了多 ...

谢谢你的耐心解答~

回复你的前两点。

1,空白是模板是无菌水,其他都加了的。
2,胶浓度就是2%的。

想请教一下,为什么不是我要的条带呢?
3楼2012-03-13 23:13:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

baby1_9253344

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by fungixx at 2012-03-13 22:08:23:
这点用质量也太差了,marker都这么模糊
1. 0空白是什么,没有模板么,还是没有引物,还是怎么的?
2. 我想说,这很可能不是你要的带的。你跑小片段的时候,胶浓度高点,2%或许可能更好些
3. 紫外下切割要不了多 ...

感觉好像是因为胶做的比较厚所以拍照是灰色的,跑0.8%胶的时候就比较亮。
4楼2012-03-13 23:17:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 岩土工程学报什么时候才能终审完呐 25+3 yeager111 2026-08-10 4/200 2026-08-16 20:42 by tfang
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +9 Ldrop2023 2026-08-13 9/450 2026-08-16 13:24 by wukun_007
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +6 wangze12014 2026-08-14 7/350 2026-08-15 20:12 by gltch
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +12 Tide man 2026-08-10 13/650 2026-08-15 16:34 by 氺木
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
信息提示
请填处理意见