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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白纯化问题
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清木ing

铜虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白纯化问题

我现在有个蛋白，其中含有很多杂蛋白。我要的目标蛋白带酸性的，我通过DEAE和分子筛都无法得到目标蛋白，哪位高人给点意见啊，急死我了
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1楼 2012-02-20 10:09:19
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lihuan0525

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
amisking(金币+1): 鼓励发帖交流！ 2012-02-20 19:38:34
既然你的蛋白那么多，肯定是过一根柱子是不行的，也不知道你蛋白的等电点，我觉得你可以先过分子筛，在过离子交换，或者反过来试试也行，过离子交换不止一根柱子。
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2楼2012-02-20 10:25:44
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xiaomai1215

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
试试其他分离原理不同的色谱呢？比如疏水类的柱子
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3楼2012-02-20 16:14:13
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wujiul590

禁虫 (正式写手)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
4楼2012-02-20 16:18:50
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baodongq

禁虫 (正式写手)
感谢参与，应助指数 +1
amisking(金币+3): 鼓励积极应助！ 2012-02-20 19:38:41
本帖内容被屏蔽
5楼2012-02-20 17:14:27
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jinpeng_6118

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
进行盐析，如硫酸铵沉淀
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人生百态原为海，看破红尘方为岸！
6楼2012-02-20 17:15:54
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清泉

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
分离后蛋白要做什么用呢，我个人认为如果可以，可以通过2-D电泳分离了再回收可能会比较好！
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宝剑锋从磨砺出，梅花香自苦寒来！
7楼2012-02-21 19:45:49
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laojiu9878

至尊木虫 (文坛精英)

九牛

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
等电点电泳可以。
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但愿人长久
8楼2012-02-22 09:14:51
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若水5886

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不知道你说的没有得到目的蛋白是什么意思，是指没有得到纯的目的蛋白呢还是没有洗脱下来蛋白？
如果是没有得到纯蛋白，你可以改变pH，或者你的蛋白有标签的话可以选择特异性的柱子来纯化
如果是没有洗脱下来蛋白，那就增加离子强度
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9楼2012-02-22 10:24:54
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飞雪迷影

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以用电洗脱法浓缩蛋白，透析膜透析，效果很好
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10楼2012-02-22 10:40:07
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