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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蓝白斑筛选时IPTG，Xgal，Amp的用量
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zhang8826857

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 蓝白斑筛选时IPTG，Xgal，Amp的用量

蓝白斑筛选时IPTG，Xgal，Amp的用量具体是多少啊？
来个权威的！！！看了网上好多说法，都不大相同。。。。。纠结的我啊！
要权威的啊！！！咱不差钱。还有母液浓度，工作浓度等等
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好孩子！
1楼 2012-01-09 15:26:57
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豆豆鱼

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857(金币+3): ★有帮助 2012-01-10 20:44:58
我们参照宝生物公司的商品目录上的浓度操作，具体的你可以到宝生物官网上查询到的。
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3楼2012-01-09 22:05:05
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liuyu_sdili

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+4): Good！ 2012-01-09 17:39:10
zhang8826857(金币+5): ★★★很有帮助 2012-01-10 20:44:51
Amp肯定是100ug/mg,x-gal是2%,每个平板取40uL涂布，IPTG是20%，每个平板取7uL涂布~~~以上是分子克隆里面的说法，其实只要能显色就行，可以自己调整的。我刚做了一次发现显色较浅，可能是显色剂x-gal有问题，多多交流吧~~~
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2楼2012-01-09 16:13:00
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zhang8826857

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 豆豆鱼 at 2012-01-09 22:05:05:
我们参照宝生物公司的商品目录上的浓度操作，具体的你可以到宝生物官网上查询到的。

我找了找没找到啊，你帮我找下吧，50金币都给你
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好孩子！
4楼2012-01-09 22:18:44
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
小丹木木(金币+1, MolEPI+1): GOOD! 2012-01-10 09:45:41
西瓜(金币+3): Good!追加奖励~ 2012-01-10 15:51:06
zhang8826857(金币+10): ★★★很有帮助 2012-01-10 20:44:38
zhang8826857(金币+5): ★有帮助 2012-01-10 20:45:09
zhang8826857(金币+4): ★★★很有帮助 2012-01-10 20:46:19
引用回帖:
4楼: Originally posted by zhang8826857 at 2012-01-09 22:18:44:
我找了找没找到啊，你帮我找下吧，50金币都给你

首先把IPTG配制成24 mg/ml（100 mM）的水溶液，并进行过滤除菌后保存。然
   后在100 ml的琼脂培养基中，加入100 μl的上述溶液、200 μl的X-Gal（20 mg/ml
    的二甲基甲酰胺（DMF）溶液）和100 μl的Amp（100 mg/ml），制作成IPTG、
    X-Gal、Amp平板培养基。
  当DNA片段插入至pUC系列载体（或其他带有lacZ、Amp基因载体），然后转化
至lacZ缺失细胞中后，涂布上述的IPTG、X–Gal、Amp平板培养基，可根据长出
  菌体的蓝白色，而方便地挑选出基因重组体（白色为具有DNA插入片段的基因重组
体）.
这是它们的原文，http://www.takara.com.cn/?action ... =445&subclass=1，这是链接，点击一下说明书，下载就可以了。金币就免了，哈哈。
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5楼2012-01-10 08:51:11
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