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zhang8826857铁杆木虫 (著名写手)
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[求助]
蓝白斑筛选时IPTG，Xgal，Amp的用量
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蓝白斑筛选时IPTG，Xgal，Amp的用量具体是多少啊？ 来个权威的！！！看了网上好多说法，都不大相同。。。。。纠结的我啊！ 要权威的啊！！！咱不差钱。还有母液浓度，工作浓度等等 |
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2楼2012-01-09 16:13:00
zhang8826857
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4楼2012-01-09 22:18:44
joan198108
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【答案】应助回帖
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西瓜(金币+3): Good!追加奖励~ 2012-01-10 15:51:06
zhang8826857(金币+10): ★★★很有帮助 2012-01-10 20:44:38
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首先把IPTG配制成24 mg/ml（100 mM）的水溶液，并进行过滤除菌后保存。然 后在100 ml的琼脂培养基中，加入100 μl的上述溶液、200 μl的X-Gal（20 mg/ml 的二甲基甲酰胺（DMF）溶液）和100 μl的Amp（100 mg/ml），制作成IPTG、 X-Gal、Amp平板培养基。 当DNA片段插入至pUC系列载体（或其他带有lacZ、Amp基因载体），然后转化 至lacZ缺失细胞中后，涂布上述的IPTG、X–Gal、Amp平板培养基，可根据长出 菌体的蓝白色，而方便地挑选出基因重组体（白色为具有DNA插入片段的基因重组 体）. 这是它们的原文，http://www.takara.com.cn/?action ... =445&subclass=1，这是链接，点击一下说明书，下载就可以了。金币就免了，哈哈。 |
5楼2012-01-10 08:51:11
