应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蓝白斑筛选时IPTG，Xgal，Amp的用量
151/2返回列表12下一页
查看: 13803  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看

zhang8826857

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 蓝白斑筛选时IPTG，Xgal，Amp的用量

蓝白斑筛选时IPTG，Xgal，Amp的用量具体是多少啊？
来个权威的！！！看了网上好多说法，都不大相同。。。。。纠结的我啊！
要权威的啊！！！咱不差钱。还有母液浓度，工作浓度等等
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

分子生化实验经验积累 蛋白质生物学实验经验 核酸生物学实验经验 细胞生物学实验经验
【分子生物】EPI帖 学习方法 分子生物分析技术 Enjoy my life！

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
好孩子！
1楼 2012-01-09 15:26:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
小丹木木(金币+1, MolEPI+1): GOOD! 2012-01-10 09:45:41
西瓜(金币+3): Good!追加奖励~ 2012-01-10 15:51:06
zhang8826857(金币+10): ★★★很有帮助 2012-01-10 20:44:38
zhang8826857(金币+5): ★有帮助 2012-01-10 20:45:09
zhang8826857(金币+4): ★★★很有帮助 2012-01-10 20:46:19
引用回帖:
4楼: Originally posted by zhang8826857 at 2012-01-09 22:18:44:
我找了找没找到啊，你帮我找下吧，50金币都给你

首先把IPTG配制成24 mg/ml（100 mM）的水溶液，并进行过滤除菌后保存。然
   后在100 ml的琼脂培养基中，加入100 μl的上述溶液、200 μl的X-Gal（20 mg/ml
    的二甲基甲酰胺（DMF）溶液）和100 μl的Amp（100 mg/ml），制作成IPTG、
    X-Gal、Amp平板培养基。
  当DNA片段插入至pUC系列载体（或其他带有lacZ、Amp基因载体），然后转化
至lacZ缺失细胞中后，涂布上述的IPTG、X–Gal、Amp平板培养基，可根据长出
  菌体的蓝白色，而方便地挑选出基因重组体（白色为具有DNA插入片段的基因重组
体）.
这是它们的原文，http://www.takara.com.cn/?action ... =445&subclass=1，这是链接，点击一下说明书，下载就可以了。金币就免了，哈哈。
赞一下(5人) 回复此楼
5楼2012-01-10 08:51:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

liuyu_sdili

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+4): Good！ 2012-01-09 17:39:10
zhang8826857(金币+5): ★★★很有帮助 2012-01-10 20:44:51
Amp肯定是100ug/mg,x-gal是2%,每个平板取40uL涂布，IPTG是20%，每个平板取7uL涂布~~~以上是分子克隆里面的说法，其实只要能显色就行，可以自己调整的。我刚做了一次发现显色较浅，可能是显色剂x-gal有问题，多多交流吧~~~
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2012-01-09 16:13:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

豆豆鱼

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857(金币+3): ★有帮助 2012-01-10 20:44:58
我们参照宝生物公司的商品目录上的浓度操作，具体的你可以到宝生物官网上查询到的。
赞一下 回复此楼
3楼2012-01-09 22:05:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhang8826857

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 豆豆鱼 at 2012-01-09 22:05:05:
我们参照宝生物公司的商品目录上的浓度操作，具体的你可以到宝生物官网上查询到的。

我找了找没找到啊，你帮我找下吧，50金币都给你
赞一下 回复此楼
好孩子！
4楼2012-01-09 22:18:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

豆豆鱼

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

zhang8826857(金币+5): ★有帮助 2012-01-10 20:45:22
楼上的已经帮你找到了，你自己看看会有帮助的，另外如果有其他实验试剂方面的问题，你也可以到一些有名的生物公司网站上查找使用说明，会对你有帮助的，祝实验顺利！
赞一下 回复此楼
6楼2012-01-10 09:55:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

豆豆鱼

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by joan198108 at 2012-01-10 08:51:11:
首先把IPTG配制成24 mg/ml（100 mM）的水溶液，并进行过滤除菌后保存。然
   后在100 ml的琼脂培养基中，加入100 μl的上述溶液、200 μl的X-Gal（20 mg/ml
    的二甲基甲酰胺（DMF）溶液）和100 μl的Amp（ ...

呵呵，楼上的真是热心，具体位置都给找全了，
赞一下 回复此楼
7楼2012-01-10 09:58:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

AnaSequence

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+3): 鼓励应助！经验哦！ 2012-01-10 15:52:35
zhang8826857(金币+5): ★有帮助 2012-01-10 20:45:28
Amp少一点也是可以的，只要不养过头出来太多卫星菌落就可以了。IPTG多加一点也是可以的，加多的话，直接跟Amp一起加到培养基，混合再倒板都可以，就是起诱导作用而已。底物X-gal不能少，一般最后加，加了就要赶紧涂布，特别是平板吹得比较干的情况下，不然涂不均匀，影响显色。显色不好的话，放4°C冰箱，有帮助。
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2012-01-10 11:34:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

longrna

新虫 (正式写手)
★ ★
西瓜(金币+2): 也是可以的 2012-01-10 15:52:49
我们是制作Amp培养基。
然后在涂板前加入IPTG、X-Gal及菌液一起涂于平板上。
赞一下(1人) 回复此楼
伟大航线....
9楼2012-01-10 15:49:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

痴客

木虫 (正式写手)

吃货250

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木(金币+1): 鼓励应助 2012-01-10 20:12:16
zhang8826857(金币+5): ★有帮助 2012-01-10 20:45:40
2%的x-gal,每个平板取40uL涂布，20%的IPTG每个平板取7uL涂布，amp 3uL，一共是50μL；可以根据平板数量配混合液，注意x-gal要避光，涂完的平板也要避光
赞一下(1人) 回复此楼
因为这个世界上这么多的狼，我这只牧羊犬只好放弃我的温顺，向着这个世界放出最耀眼的光。
10楼2012-01-10 17:14:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zhang8826857 的主题更新
151/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 310求调剂 +13 666真好 2026-04-11 14/700 2026-04-12 16:48 by 1005715100
[考研] 303求调剂 +14 SereinQ 2026-04-10 15/750 2026-04-11 20:43 by 蓝云思雨
[考研] 电子信息279求调剂，有书读就行 +8 wwwooden 2026-04-08 11/550 2026-04-11 20:22 by cq2548
[考研] 270求调剂 +14 杨乐369 2026-04-11 14/700 2026-04-11 20:16 by 蓝云思雨
[考研] 269求调剂 +11 啊啊我我 2026-04-07 11/550 2026-04-11 16:45 by vgtyfty
[考研] 生物学调剂 可调剂到生物与医药 +8 李政莹 2026-04-06 9/450 2026-04-11 10:36 by wwj2530616
[考研] 085402通信工程调剂，有4项学科竞赛国奖（电赛国二），硕士研究生调剂自荐信。 +5 m永o不v言o弃m 2026-04-09 5/250 2026-04-11 09:33 by zhq0425
[考研] 一志愿东北大学控制工程085406数二英二385，求调剂 +8 Ezra_Zhang 2026-04-09 8/400 2026-04-11 09:15 by 猪会飞
[考研] 291 求调剂 +29 化工2026届毕业� 2026-04-09 29/1450 2026-04-10 22:55 by dick_runner
[考研] 284求调剂 +9 让我上岸吧阿西 2026-04-09 11/550 2026-04-10 19:18 by 靖jing
[考研] 0702物理学学硕299求调剂 +6 祁柒连 2026-04-06 6/300 2026-04-10 11:10 by Roomoo
[考研] 求调剂 +11 翩翩一书生 2026-04-09 13/650 2026-04-10 10:27 by liuhuiying09
[考研] 求机械专硕297第二批调剂 +5 拾柒12。 2026-04-08 5/250 2026-04-09 16:43 by 允当适度
[考研] 265求调剂 +4 风说她早忘了 2026-04-07 4/200 2026-04-09 13:59 by only周
[考研] 二次调剂求老师收留 +3 笑笑袁 2026-04-08 3/150 2026-04-08 23:50 by 醉在风里
[考研] 材料调剂 +14 一样YWY 2026-04-06 14/700 2026-04-08 23:00 by 猪会飞
[考研] 一志愿南京航空航天大学 材料与化工329分求调剂 +11 Mr. Z 2026-04-05 12/600 2026-04-08 16:15 by luoyongfeng
[考研] 338求调剂 +8 wxygxsaaaaa 2026-04-06 8/400 2026-04-08 06:58 by 无际的草原
[考研] 一志愿南科大生物学297分，求调剂推荐 +8 Y-yyusx 2026-04-06 9/450 2026-04-07 19:38 by biomichael
[考研] 081200-11408-367学硕求调剂 +4 1_2_3111 2026-04-06 4/200 2026-04-07 08:13 by jp9609
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭