24小时热门版块排行榜    

查看: 2335  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

hufei1010785

铁杆木虫 (小有名气)

[求助] 原核表达纯化蛋白

最近利用原核表达技术,纯化获得了一个GST蛋白,SDS-PAGE显示位置正确,但是用酶标仪没有检测到活性啊,求助这是怎么回事啊!谢谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hzlatqh

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
小丹木木(金币+1): 鼓励应助 2012-01-04 08:46:35
融合蛋白就是有一定的风险失去原有的活性,这一点很多例子。
两个黄鹂鸣翠柳,一行白鹭上青天
3楼2012-01-03 23:57:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西瓜(金币+3, 专家考核): Good! 2012-01-04 12:19:52
带GST纯化标签的蛋白是融合蛋白,检测不到活性也正常呀。蛋白融合后GST和目的蛋白的空间结构都可能发生改变,酶有没有活性跟形成的空间结构关系密切。可以纯化出来的蛋白酶切去除GST标签后再试试检测活性。
2楼2012-01-03 21:56:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

月月大可

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木(金币+2): 很有帮助哦 2012-01-04 08:47:11
就算去除标签也一样可能没有活性。不是说你的蛋白可溶表达了它就正确折叠了,不正确折叠当然没有活性。
建议:先用酶在柱上讲标签切除后尝试活性检测,而后如果还是没有活性就可以需要考虑更换表达体系了
4楼2012-01-04 02:56:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hufei1010785

铁杆木虫 (小有名气)

好的,谢谢大家!
5楼2012-01-04 09:21:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料与化工(0856)304求 B区 调剂 +3 邱gl 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:47 by lature00
[考研] 一志愿西安交通大学材料工程专业 282分求调剂 +7 枫桥ZL 2026-03-18 9/450 2026-03-21 09:56 by JineShine
[考研] 306求调剂 +4 chuanzhu川烛 2026-03-18 4/200 2026-03-21 08:25 by laoshidan
[考研] 求调剂 +6 Mqqqqqq 2026-03-19 6/300 2026-03-21 08:04 by JourneyLucky
[考研] 机械专硕299求调剂至材料 +3 kkcoco25 2026-03-16 4/200 2026-03-21 03:52 by JourneyLucky
[考研] 265求调剂 +3 Jack?k?y 2026-03-17 3/150 2026-03-21 03:17 by JourneyLucky
[考研] 280求调剂 +7 咕噜晓晓 2026-03-18 8/400 2026-03-21 01:27 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华中科技大学,080502,354分求调剂 +5 守候夕阳CF 2026-03-18 5/250 2026-03-21 01:06 by JourneyLucky
[考研] 295求调剂 +4 一志愿京区211 2026-03-18 6/300 2026-03-20 23:41 by JourneyLucky
[考研] 321求调剂 +9 何润采123 2026-03-18 11/550 2026-03-20 23:19 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南京理工大学085701资源与环境302分求调剂 +4 葵梓卫队 2026-03-18 6/300 2026-03-20 23:02 by JourneyLucky
[考研] 求调剂一志愿南京航空航天大学289分 +3 @taotao 2026-03-19 3/150 2026-03-20 21:34 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工专硕调剂 +7 heming3743 2026-03-16 7/350 2026-03-20 19:31 by zhukairuo
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +7 困于星晨 2026-03-17 9/450 2026-03-20 17:38 by 无懈可击111
[考研] 288求调剂,一志愿华南理工大学071005 +5 ioodiiij 2026-03-17 5/250 2026-03-19 18:22 by zcl123
[考研] 311求调剂 +11 冬十三 2026-03-15 12/600 2026-03-18 14:36 by 星空星月
[考研] 0854可跨调剂,一作一项核心论文五项专利,省、国级证书40+数一英一287 +8 小李0854 2026-03-16 8/400 2026-03-18 14:35 by 搏击518
[考研] 293求调剂 +11 zjl的号 2026-03-16 16/800 2026-03-18 08:10 by zhukairuo
[考博] 26博士申请 +3 1042136743 2026-03-17 3/150 2026-03-17 23:30 by 轻松不少随
[考研] 070305求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-14 4/200 2026-03-15 11:04 by peike
信息提示
请填处理意见