应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 原核表达纯化蛋白
51/1返回列表
查看: 2256  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

hufei1010785

铁杆木虫 (小有名气)

[求助] 原核表达纯化蛋白

最近利用原核表达技术，纯化获得了一个GST蛋白，SDS-PAGE显示位置正确，但是用酶标仪没有检测到活性啊，求助这是怎么回事啊！谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-01-03 17:12:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hzlatqh

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木(金币+1): 鼓励应助 2012-01-04 08:46:35
融合蛋白就是有一定的风险失去原有的活性，这一点很多例子。
赞一下(1人) 回复此楼
两个黄鹂鸣翠柳，一行白鹭上青天
3楼2012-01-03 23:57:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+3, 专家考核): Good！ 2012-01-04 12:19:52
带GST纯化标签的蛋白是融合蛋白，检测不到活性也正常呀。蛋白融合后GST和目的蛋白的空间结构都可能发生改变，酶有没有活性跟形成的空间结构关系密切。可以纯化出来的蛋白酶切去除GST标签后再试试检测活性。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2012-01-03 21:56:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

月月大可

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木(金币+2): 很有帮助哦 2012-01-04 08:47:11
就算去除标签也一样可能没有活性。不是说你的蛋白可溶表达了它就正确折叠了，不正确折叠当然没有活性。
建议：先用酶在柱上讲标签切除后尝试活性检测，而后如果还是没有活性就可以需要考虑更换表达体系了
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2012-01-04 02:56:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hufei1010785

铁杆木虫 (小有名气)
好的，谢谢大家！
回复此楼
5楼2012-01-04 09:21:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭