应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 原核表达纯化蛋白
91/1返回列表
查看: 2339  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

hufei1010785

铁杆木虫 (小有名气)

[求助] 原核表达纯化蛋白

最近利用原核表达技术，纯化获得了一个GST蛋白，SDS-PAGE显示位置正确，但是用酶标仪没有检测到活性啊，求助这是怎么回事啊！谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-01-03 17:12:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+3, 专家考核): Good！ 2012-01-04 12:19:52
带GST纯化标签的蛋白是融合蛋白，检测不到活性也正常呀。蛋白融合后GST和目的蛋白的空间结构都可能发生改变，酶有没有活性跟形成的空间结构关系密切。可以纯化出来的蛋白酶切去除GST标签后再试试检测活性。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2012-01-03 21:56:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hzlatqh

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木(金币+1): 鼓励应助 2012-01-04 08:46:35
融合蛋白就是有一定的风险失去原有的活性，这一点很多例子。
赞一下(1人) 回复此楼
两个黄鹂鸣翠柳，一行白鹭上青天
3楼2012-01-03 23:57:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

月月大可

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木(金币+2): 很有帮助哦 2012-01-04 08:47:11
就算去除标签也一样可能没有活性。不是说你的蛋白可溶表达了它就正确折叠了，不正确折叠当然没有活性。
建议：先用酶在柱上讲标签切除后尝试活性检测，而后如果还是没有活性就可以需要考虑更换表达体系了
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2012-01-04 02:56:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hufei1010785

铁杆木虫 (小有名气)
好的，谢谢大家！
回复此楼
5楼2012-01-04 09:21:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

脱水拂空

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wanhscn(金币+2): 有这个可能性！ 2012-01-04 20:30:26
你的如果是包涵体那自然没有活性啦 你先把GST切除在做活性看看怎么样
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2012-01-04 18:53:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shine372

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
先用酶切除标签后尝试活性检测，而后如果还是没有活性就需要考虑更换表达体系
赞一下 回复此楼
7楼2012-01-05 13:59:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

郜珊

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

可以用CDNB法测GST的活性
赞一下 回复此楼
8楼2013-01-28 17:29:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hubinghello

金虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 郜珊 at 2013-01-28 17:29:15
可以用CDNB法测GST的活性

有没有有关CDNB法测GST活性的方法资料？
赞一下 回复此楼
去爱吧，像不曾爱过一样；跳舞吧，像没有人观看一样；唱歌吧，像没有人聆听一样；生活吧，像每天都是世界末日一样；赚钱吧，像不是为了钱一样。
9楼2013-06-16 21:27:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 hufei1010785 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 311求调剂 +13 冬十三 2026-03-15 14/700 2026-03-21 22:10 by peike
[考研] 一志愿西安交通大学材料工程专业 282分求调剂 +10 枫桥ZL 2026-03-18 12/600 2026-03-21 22:02 by peike
[考研] 326求调剂 +4 mlpqaz03 2026-03-15 4/200 2026-03-21 19:10 by ColorlessPI
[考研] 一志愿南大，0703化学，分数336，求调剂 +3 收到VS 2026-03-21 3/150 2026-03-21 18:42 by 学员8dgXkO
[考研] 26考研一志愿中国石油大学(华东)305分求调剂 +6 嘉年新程 2026-03-15 6/300 2026-03-21 17:07 by Dream007008
[考研] 301求调剂 +10 yy要上岸呀 2026-03-17 10/500 2026-03-21 03:14 by JourneyLucky
[考研] 材料工程（专）一志愿985 初试335求调剂 +3 hiloiy 2026-03-17 4/200 2026-03-21 03:04 by JourneyLucky
[考研] 271材料工程求调剂 +8 .6lL 2026-03-18 8/400 2026-03-21 00:58 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华南师大 070300（化学）304分求调剂 +3 0703武芊慧雪304 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:48 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华中农业071010，总分320求调剂 +3 困困困困坤坤 2026-03-20 3/150 2026-03-20 20:38 by 学员8dgXkO
[考研] 材料学求调剂 +4 Stella_Yao 2026-03-20 4/200 2026-03-20 20:28 by ms629
[考研] 261求B区调剂，科研经历丰富 +3 牛奶很忙 2026-03-20 4/200 2026-03-20 19:34 by JourneyLucky
[考研] 086500 325 求调剂 +3 领带小熊 2026-03-19 3/150 2026-03-20 18:38 by 尽舜尧1
[考研] 286求调剂 +6 lemonzzn 2026-03-16 10/500 2026-03-19 14:31 by lemonzzn
[考研] 085600材料与化工求调剂 +6 绪幸与子 2026-03-17 6/300 2026-03-19 13:27 by houyaoxu
[考研] 344求调剂 +6 knight344 2026-03-16 7/350 2026-03-18 20:13 by walc
[考研] 085601专硕，总分342求调剂，地区不限 +5 share_joy 2026-03-16 5/250 2026-03-18 14:48 by haxia
[硕博家园] 湖北工业大学 生命科学与健康学院-课题组招收2026级食品/生物方向硕士 +3 1喜春8 2026-03-17 5/250 2026-03-17 17:18 by ber川cool子
[考研] 085601求调剂 +4 Du.11 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:08 by ruiyingmiao
[考研] 一志愿苏州大学材料工程（085601）专硕有科研经历三项国奖两个实用型专利一项省级立项 +6 大火山小火山 2026-03-16 8/400 2026-03-17 15:05 by 无懈可击111
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭