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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 原核表达纯化蛋白
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hufei1010785

铁杆木虫 (小有名气)

[求助] 原核表达纯化蛋白

最近利用原核表达技术，纯化获得了一个GST蛋白，SDS-PAGE显示位置正确，但是用酶标仪没有检测到活性啊，求助这是怎么回事啊！谢谢！
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1楼 2012-01-03 17:12:04
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+3, 专家考核): Good！ 2012-01-04 12:19:52
带GST纯化标签的蛋白是融合蛋白，检测不到活性也正常呀。蛋白融合后GST和目的蛋白的空间结构都可能发生改变，酶有没有活性跟形成的空间结构关系密切。可以纯化出来的蛋白酶切去除GST标签后再试试检测活性。
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2楼2012-01-03 21:56:22
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