24小时热门版块排行榜    

查看: 4820  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

@@xiaowu@@

铜虫 (初入文坛)

[求助] 细菌引物 338F 518R 做DGGE之后 pcr 已有1人参与

DGGE 之后 pcr 出来的有两条带 还不清晰 怎么回事呀 请大侠 帮分析一下

12



[ Last edited by @@xiaowu@@ on 2011-12-29 at 20:03 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

白蜓er

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 南大微生物 at 2015-04-24 23:36:14
嘿嘿 直接做二代测序好了 嘿嘿...

那如果我需要DGGE之后TA克隆测序的话,这个怎么搞嘞,请问你有没找到什么原因PCR扩增 不出来呀?
9楼2015-04-25 11:20:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

liuyj863

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857(金币+5): 鼓励新虫,加油 2011-12-30 10:53:48
PCR两条带差的较大,感觉是PCR的问题,理论上说你DGGE上样样品是大小类似的DNA,问题说明有些太简单,不好分析原因,详细说说实验方法步骤,可能有助于解决你的问题。
2楼2011-12-29 21:47:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

@@xiaowu@@

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
: Originally posted by liuyj863 at 2011-12-29 21:47:24:
PCR两条带差的较大,感觉是PCR的问题,理论上说你DGGE上样样品是大小类似的DNA,问题说明有些太简单,不好分析原因,详细说说实验方法步骤,可能有助于解决你的问题。

带GC 的pcr产物挺亮的 DGGE跑完也很好
然后是pcr

10倍buffer 2.5
dntp  2.5
F与R 1
酶  0.25
模板 5
94 1min
60 1min
72 1min
35循环
3楼2011-12-30 09:48:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuyj863

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
rainwander(金币+3): 鼓励交流 2012-01-01 17:35:30
DGGE条带割下来后,是怎么制备PCR模板的,时间放置有多长,根据我的经验,DGGE条带割出来后放置时间长了会出现扩增得不到产物,涂抹带之类的情况。另外,扩增引物也是带了GC夹?是为了再跑一次DGGE,还是...  (我以前割单条DGGE带后无菌水冲洗,置于30ul无菌水中,无菌枪头捣碎,置于4°C 过夜,第二天取1ul液体扩增,效果很好。现在很多年没做过了,详细情况也有些忘记了)
4楼2011-12-30 11:27:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿北京化工大学 070300 学硕 336分 求调剂 +7 vv迷 2026-03-22 7/350 2026-03-23 23:44 by Txy@872106
[考研] 材料292调剂 +4 橘颂思美人 2026-03-23 4/200 2026-03-23 23:16 by peike
[考研] 材料/农业专业,07/08开头均可,过线就行 +3 呵唔哦豁 2026-03-23 4/200 2026-03-23 22:30 by 汪!?!
[考研] 303求调剂 +4 元夕元 2026-03-20 4/200 2026-03-23 19:00 by macy2011
[考研] 考研化学308分求调剂 +7 你好明天你好 2026-03-23 8/400 2026-03-23 18:39 by macy2011
[考研] 306求调剂 +5 来好运来来来 2026-03-22 5/250 2026-03-22 16:17 by BruceLiu320
[考研] 298求调剂一志愿211 +3 上岸6666@ 2026-03-20 3/150 2026-03-22 15:50 by ColorlessPI
[考研] 286分人工智能专业请求调剂愿意跨考! +4 lemonzzn 2026-03-17 8/400 2026-03-21 22:49 by lemonzzn
[考研] 考研调剂 +3 呼呼?~+123456 2026-03-21 3/150 2026-03-21 20:04 by 无际的草原
[考研] 材料工程专硕 348分求调剂 +3 冬辞. 2026-03-17 5/250 2026-03-21 18:47 by 学员8dgXkO
[考研] 297求调剂 +11 戏精丹丹丹 2026-03-17 12/600 2026-03-21 17:47 by ColorlessPI
[考研] 268求调剂 +9 简单点0 2026-03-17 9/450 2026-03-21 15:37 by lature00
[考研] 一志愿天津大学化学工艺专业(081702)315分求调剂 +12 yangfz 2026-03-17 12/600 2026-03-21 03:30 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华中科技大学,080502,354分求调剂 +5 守候夕阳CF 2026-03-18 5/250 2026-03-21 01:06 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华南师大 070300(化学)304分求调剂 +3 0703武芊慧雪304 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:48 by JourneyLucky
[考研] 一志愿中海洋材料工程专硕330分求调剂 +8 小材化本科 2026-03-18 8/400 2026-03-20 23:16 by JourneyLucky
[考研] 求调剂,一志愿:南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕,总分289分 +4 @taotao 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:14 by JourneyLucky
[考研] 中南大学化学学硕337求调剂 +3 niko- 2026-03-19 6/300 2026-03-20 21:58 by luoyongfeng
[考研] 一志愿吉林大学材料学硕321求调剂 +11 Ymlll 2026-03-18 15/750 2026-03-20 19:40 by 丁丁*
[考研] 085600材料与化工求调剂 +6 绪幸与子 2026-03-17 6/300 2026-03-19 13:27 by houyaoxu
信息提示
请填处理意见