应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 我的pcr产物怎么跟瀑布一样，究竟是为什么
471/5返回列表12345下一页
查看: 3381  |  回复: 46
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

huichong

铁虫 (初入文坛)

[求助] 我的pcr产物怎么跟瀑布一样，究竟是为什么

大家帮忙看看，我p的是老师原来pcr的产物，大概9kb，我拿这做模板，怎么p出来是这样子的啊，究竟什么原因啊，
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-12-27 00:50:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

zhangxn2010

木虫 (著名写手)

让一切随风飞翔

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3): Good！ 2011-12-31 22:09:08
引用回帖:
18楼: Originally posted by huichong at 2011-12-31 02:02:14:
呵呵，我的模板测得浓度是49ng/ul，我稀释10倍还是这样的，要是稀释1000倍的话会不会太稀。要求的大概也得2-10ng/ul啊？？谢谢

要求的没那么高浓度，你说的1-10ng/ul可能指的是基因组DNA的浓度，因为某些基因在基因组中拷贝数较低，所以基因组作模板PCR需较高的浓度。
但你的实验中用的别人的PCR产物，条带不会很大，所以可以使用很低的模板浓度。
PS：我做载体构建的时候使用不同质粒做模板（大约7K-10K），浓度一般在10-50pg/ul（pg是ng的1/1000）,也就是将小提的质粒稀释1000倍。
赞一下(2人) 回复此楼
一直向前！
22楼2011-12-31 11:31:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

heroyl

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
没图片啊楼主！！
赞一下 回复此楼
实验虐我千百遍，我待实验如初恋
2楼2011-12-27 16:43:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wwb95599

铜虫 (小有名气)
求图片！
回复此楼
只要路是对的，就不怕路远．
3楼2011-12-27 16:48:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

amylose108

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木(金币+1): 鼓励应助哦 2012-01-04 08:48:30
我也做过很多这样的PCR,我分析多半是由于引物不好造成的,但如果你能把DNA摸板弄的够纯质量高的话,也可避免
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-12-27 21:36:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huichong

铁虫 (初入文坛)
西瓜: 回帖置顶 2011-12-28 13:12:32
诶。。。额明明传图了。怎没了？现穿上。。。

左右都是maker
赞一下 回复此楼
5楼2011-12-28 01:25:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huichong

铁虫 (初入文坛)
我的模板今天测了260/280是1.85
赞一下 回复此楼
6楼2011-12-28 01:28:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+2): good 2011-12-28 13:13:23
PCR产物用作模板再p的话很容易出现这样的弥散
是由于模板浓度太高引起的  稀释模板50倍，百倍甚至上千倍 基本上应该能解决
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2011-12-28 08:39:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huichong

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by 老夏853 at 2011-12-28 08:39:47:
PCR产物用作模板再p的话很容易出现这样的弥散
是由于模板浓度太高引起的  稀释模板50倍，百倍甚至上千倍 基本上应该能解决

那会不会是我操作或是引物的问题啊，谢谢你
赞一下 回复此楼
8楼2011-12-28 09:43:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangxn2010

木虫 (著名写手)

让一切随风飞翔

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-12-28 13:13:43
你测定的模板260/280是1.85
，证明你的模板纯度高且浓度高（因为太低就测不出来了），所以稀释吧，1000倍
赞一下(1人) 回复此楼
一直向前！
9楼2011-12-28 12:41:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wwb95599

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+2): 鼓励 2011-12-29 16:51:33
我做的时候也常出现这种情况,应该不是引物的问题.可能是电泳时候加样过多,或者PCR时候模板浓度过高造成的!建议楼主稀释下模板,另电泳时候加样可以少加点.
赞一下(1人) 回复此楼
只要路是对的，就不怕路远．
10楼2011-12-28 20:04:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 huichong 的主题更新
471/5返回列表12345下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料与化工371求调剂 +16 陪琳看海 2026-04-04 17/850 2026-04-09 23:27 by 来看流星雨10
[考研] 085500求调剂材料 +8 易11122 2026-04-09 8/400 2026-04-09 23:15 by parmtree
[考研] 286求调剂 +6 草木不言 2026-04-04 6/300 2026-04-09 21:06 by 286640313
[考研] 一志愿东北大学控制工程085406数二英二385，求调剂 +4 Ezra_Zhang 2026-04-09 4/200 2026-04-09 20:59 by boxking200
[考研] 301求调剂 +5 静静想想 2026-04-05 5/250 2026-04-09 20:58 by 运气yunqi
[考研] 0703调剂 +18 拾玖壹 2026-04-04 20/1000 2026-04-09 20:53 by zhouxiaoyu
[考研] 工科273调剂 +4 X1999 2026-04-09 5/250 2026-04-09 16:05 by wp06
[考研] 085404 293求调剂 +7 勇远库爱314 2026-04-08 7/350 2026-04-09 16:02 by 猪会飞
[考研] 283电子信息求调剂 +4 三石WL 2026-04-08 4/200 2026-04-09 10:21 by wp06
[考研] 328求调剂 +17 lftmya 2026-04-07 18/900 2026-04-09 08:05 by 5268321
[考研] 环境专硕调剂 +15 会说话的肘子 2026-04-06 15/750 2026-04-08 18:56 by 环化材-小生
[考研] 调剂 +3 电气300求调剂不 2026-04-08 6/300 2026-04-08 09:39 by 电气300求调剂不
[考研] 信工所11408 340分 本科西安交大自动化 +3 moontrek 2026-04-06 3/150 2026-04-07 09:56 by chongya
[考研] 085100建筑学 寻求跨专业调剂 一志愿南大294分 校级省级国家级奖项若干 踏实肯干 +3 1021075758 2026-04-06 4/200 2026-04-07 09:23 by 蓝云思雨
[考研] 生物学学硕求调剂：351分一志愿南京师范大学生物学专业 +6 …～、王…～ 2026-04-06 7/350 2026-04-06 18:54 by macy2011
[考研] 295求调剂 +4 A你好研究生 2026-04-04 5/250 2026-04-04 22:46 by yu221
[考研] 333求调剂 +12 wfh030413@ 2026-04-03 13/650 2026-04-04 21:02 by jj987
[考研] 350一志愿北京航空航天大学08500材料科学与工程求调剂 +5 kjnasfss 2026-04-03 5/250 2026-04-03 22:29 by 无际的草原
[考研] 285求调剂 +5 AZMK 2026-04-03 8/400 2026-04-03 18:17 by AZMK
[考研] 求调剂机会 +5 意染ivy 2026-04-03 5/250 2026-04-03 15:13 by qoooooo614
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭