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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 我的pcr产物怎么跟瀑布一样，究竟是为什么
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ccjjx

新虫 (初入文坛)
我震惊了！！！
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41楼2012-02-29 21:12:33
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ccjjx

新虫 (初入文坛)
我真的震惊了！！为什么会有个人跟我一模一样的处境呢？！！我也是在做一个9KB的PCR，开始也用的老师的PCR产物（怕用完了，现在该用colony了），一样的P不出来。同样的实验，也是之前老师做成功过，同样的体系，同样的条件，到我这里就是做不出来！！跟楼主一样的退火温度，用的一样的酶，跑出来一样的瀑布状····我泪奔啊·····看到楼主的帖子，我还以为是我什么时候自己发的呢！
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42楼2012-02-29 21:16:14
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steler_ly

铜虫 (正式写手)
有可能是浓度太高了  稀释下试试！
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43楼2012-02-29 22:20:12
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jbbdpp

银虫 (小有名气)
换个更好的酶试一下，我也遇到过类似的问题，把模板的量减少，用的ex taq,结果马上就好了。
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44楼2012-04-15 11:04:00
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ZMJ_jeremy

新虫 (小有名气)
模板260/280是1.85 只能说明纯度可以   那浓度是多少？浓度过高虽容易变脏 但不至于瀑布      瀑布原因可推测为： 1模板自身是否被污染 （微生物之类）； 2 引物是否是自己设计的？设计是否符合标准？
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45楼2012-04-15 12:05:51
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ZMJ_jeremy

新虫 (小有名气)
补充：还有产物的大小  如果太大或是CG浓度过高 还要考虑更换taq
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46楼2012-04-15 12:07:55
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没有头的苍蝇

铁虫 (初入文坛)
我也遇到类似的情况，引物应该不会又什么问题，最有可能的就是你的模板要么是浓度太高，要么是是被污染的可能性很大，当然也有可能是降解了。希望楼主能够早日搞定！
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47楼2014-04-07 01:05:02
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