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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 我的pcr产物怎么跟瀑布一样，究竟是为什么
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huichong

铁虫 (初入文坛)

[求助] 我的pcr产物怎么跟瀑布一样，究竟是为什么

大家帮忙看看，我p的是老师原来pcr的产物，大概9kb，我拿这做模板，怎么p出来是这样子的啊，究竟什么原因啊，
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1楼 2011-12-27 00:50:03
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zhangxn2010

木虫 (著名写手)

让一切随风飞翔

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★
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西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-12-28 13:13:43
你测定的模板260/280是1.85
，证明你的模板纯度高且浓度高（因为太低就测不出来了），所以稀释吧，1000倍
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一直向前！
9楼2011-12-28 12:41:57
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zhangxn2010

木虫 (著名写手)

让一切随风飞翔

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3): Good！ 2011-12-31 22:09:08
引用回帖:
18楼: Originally posted by huichong at 2011-12-31 02:02:14:
呵呵，我的模板测得浓度是49ng/ul，我稀释10倍还是这样的，要是稀释1000倍的话会不会太稀。要求的大概也得2-10ng/ul啊？？谢谢

要求的没那么高浓度，你说的1-10ng/ul可能指的是基因组DNA的浓度，因为某些基因在基因组中拷贝数较低，所以基因组作模板PCR需较高的浓度。
但你的实验中用的别人的PCR产物，条带不会很大，所以可以使用很低的模板浓度。
PS：我做载体构建的时候使用不同质粒做模板（大约7K-10K），浓度一般在10-50pg/ul（pg是ng的1/1000）,也就是将小提的质粒稀释1000倍。
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一直向前！
22楼2011-12-31 11:31:37
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