24小时热门版块排行榜    

查看: 2665  |  回复: 9
【悬赏金币】回答本帖问题,作者xiaoyang123将赠送您 1 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

xiaoyang123

金虫 (小有名气)

[求助] PCR目的条带没跑出,但是跑出了特异性很强的单一条带,是什么原因呢?

PCR目的条带没跑出,但是跑出了特异性很强的单一条带,是什么原因呢?

其实不是很确定目的基因是否存在,如果存在,目的条带的期望长度是1300bp左右,但是跑出的单一条带却在900bp左右,而且用的是TAKARA HS Taq酶(高特异性Taq酶)……这会是什么原因造成的呢?

高特异性聚合酶是否只是防止突变,并不会减少假阳性呢?

但是跑出了单一带,怎么偏偏不是目的条带呢,太诡异了~~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zlu520

至尊木虫 (职业作家)

限制人

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by zlu520 at 2011-11-20 23:51:40:
有可能扩增不完全。。。。

酶没问题的话。引物也可造成。
无完人!
9楼2011-11-24 15:58:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

zlu520

至尊木虫 (职业作家)

限制人

【答案】应助回帖

xiaoyang123(金币+1): 或许是扩增不完全,可是延伸时间为2min,应该已经比较长了吧,是否有其它原因导致了扩增不完全~~ 2011-11-24 14:35:33
引用回帖:
1楼: Originally posted by xiaoyang123 at 2011-11-20 22:04:03:
PCR目的条带没跑出,但是跑出了特异性很强的单一条带,是什么原因呢?

其实不是很确定目的基因是否存在,如果存在,目的条带的期望长度是1300bp左右,但是跑出的单一条带却在900bp左右,而且用的是TAKARA HS T ...

有可能扩增不完全。。。。
无完人!
2楼2011-11-20 23:51:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

allmessup

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

xiaoyang123(金币+1): 又一种可能 2011-11-24 14:35:57
引用回帖:
2楼: Originally posted by zlu520 at 2011-11-20 23:51:40:
有可能扩增不完全。。。。

re~如果存在相似度高的序列片段有可能被误以为是复制终点~
Ipsascientiapotestasest.
3楼2011-11-21 07:00:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

moqiyilei

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

xiaoyang123(金币+1): 引物在Genebank上比对匹配度都不高,是直接来自文献的,所以实验一开始就有点空中楼阁的感觉 2011-11-24 14:36:54
引物blast一下,看是否具有特异性。
4楼2011-11-21 09:09:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 为什么小修又是送审 +6 woshichuxuan 2024-11-16 8/400 2024-11-16 23:33 by nono2009
[教师之家] 评正教授需要两个国家级项目,有人用子课题糊弄,结果在评审前资格公示时被举报拿下了 +25 瞬息宇宙 2024-11-12 38/1900 2024-11-16 20:20 by dxcharlary
[教师之家] 我感觉当老师好累啊。。 +22 fairy1122 2024-11-15 23/1150 2024-11-16 18:31 by otani
[论文投稿] 期刊选择 +3 上善若水 cc 2024-11-15 4/200 2024-11-16 17:21 by BladeShen
[论文投稿] 找不到审稿人 +7 吉祥如意141913 2024-11-13 7/350 2024-11-16 15:09 by 羊驼22
[基金申请] 博后资助名单出来了 +14 Shxjjxjkx 2024-11-14 16/800 2024-11-16 14:16 by icm639
[精细化工] 同一个反应相同的反应条件,是不是反应结果相差不大? +6 青霉素 2024-11-11 6/300 2024-11-16 13:35 by linjunc
[第一性原理] 有没有要一起买VASP版权的,可以6个人 5+3 变成小神 2024-11-14 9/450 2024-11-16 13:33 by dxcharlary
[教师之家] 这种人痛苦吗 +12 2671 2024-11-12 14/700 2024-11-15 22:15 by 仇恨毁灭财富
[论文投稿] chemical science和advanced science哪个好一点 +6 yly150 2024-11-12 6/300 2024-11-15 21:06 by hcj9909053
[论文投稿] angew三个小修,返修过去已经20多天了没动静,有朋友遇到这种情况吗? +5 迟迟未到场 2024-11-14 5/250 2024-11-15 20:16 by 秦时明月zy
[教师之家] 大学老师 +11 考研一路顺风 2024-11-13 14/700 2024-11-15 15:24 by LNP@mRNA
[基金申请] 求助 +4 Enenenene 2024-11-15 4/200 2024-11-15 09:36 by 榨菜拌青椒
[硕博家园] 课题和专业一点都不相关怎么办 +7 imt4n9 2024-11-11 10/500 2024-11-15 01:55 by 成长虫
[论文投稿] 投稿系统中的通讯作者和文章中的通讯作者不一样,文章目前被录用了? +4 babybabygo 2024-11-12 5/250 2024-11-14 19:13 by 走了002
[硕博家园] 研究生的生活该是什么样 +4 lqy0719 2024-11-14 4/200 2024-11-14 16:45 by 阿荣喝酒
[有机交流] 同一个反应回流情况不同 20+3 1853846 2024-11-12 3/150 2024-11-14 15:42 by 太阳谷
[基金申请] 第76批博士后面上大概什么时间公示 +6 探际者 2024-11-11 7/350 2024-11-14 10:06 by Foxicut88
[硕博家园] 如何看清华北大硕博的毕业论文 +6 2025lucky 2024-11-10 6/300 2024-11-12 22:46 by 楚扬长流
[硕博家园] 同步辐射 +4 小张要加油努力 2024-11-10 7/350 2024-11-11 13:47 by mpdfwxgui
信息提示
请填处理意见