24小时热门版块排行榜    

查看: 2547  |  回复: 9
【悬赏金币】回答本帖问题,作者xiaoyang123将赠送您 1 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

xiaoyang123

金虫 (小有名气)

[求助] PCR目的条带没跑出,但是跑出了特异性很强的单一条带,是什么原因呢?

PCR目的条带没跑出,但是跑出了特异性很强的单一条带,是什么原因呢?

其实不是很确定目的基因是否存在,如果存在,目的条带的期望长度是1300bp左右,但是跑出的单一条带却在900bp左右,而且用的是TAKARA HS Taq酶(高特异性Taq酶)……这会是什么原因造成的呢?

高特异性聚合酶是否只是防止突变,并不会减少假阳性呢?

但是跑出了单一带,怎么偏偏不是目的条带呢,太诡异了~~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zlu520

至尊木虫 (职业作家)

限制人

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by zlu520 at 2011-11-20 23:51:40:
有可能扩增不完全。。。。

酶没问题的话。引物也可造成。
无完人!
9楼2011-11-24 15:58:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

zlu520

至尊木虫 (职业作家)

限制人

【答案】应助回帖

xiaoyang123(金币+1): 或许是扩增不完全,可是延伸时间为2min,应该已经比较长了吧,是否有其它原因导致了扩增不完全~~ 2011-11-24 14:35:33
引用回帖:
1楼: Originally posted by xiaoyang123 at 2011-11-20 22:04:03:
PCR目的条带没跑出,但是跑出了特异性很强的单一条带,是什么原因呢?

其实不是很确定目的基因是否存在,如果存在,目的条带的期望长度是1300bp左右,但是跑出的单一条带却在900bp左右,而且用的是TAKARA HS T ...

有可能扩增不完全。。。。
无完人!
2楼2011-11-20 23:51:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

allmessup

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

xiaoyang123(金币+1): 又一种可能 2011-11-24 14:35:57
引用回帖:
2楼: Originally posted by zlu520 at 2011-11-20 23:51:40:
有可能扩增不完全。。。。

re~如果存在相似度高的序列片段有可能被误以为是复制终点~
Ipsascientiapotestasest.
3楼2011-11-21 07:00:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

moqiyilei

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

xiaoyang123(金币+1): 引物在Genebank上比对匹配度都不高,是直接来自文献的,所以实验一开始就有点空中楼阁的感觉 2011-11-24 14:36:54
引物blast一下,看是否具有特异性。
4楼2011-11-21 09:09:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 今年什么时候会评啊 +9 lancet0903 2024-06-24 9/450 2024-06-27 13:22 by yrzhu1984
[有机交流] 大佬们,打的核磁氢谱与chemdraw预测的有偏差 +6 来了个 2024-06-26 7/350 2024-06-27 13:09 by 张小生子
[考博] 论文被硕导卡 +4 自强不息a?a 2024-06-26 6/300 2024-06-27 12:14 by 哇卡哇卡1
[有机交流] 三颈瓶加热 5+4 wzjwx888 2024-06-20 5/250 2024-06-27 11:32 by f1yfish
[基金申请] 博后面上今天下午会公布吗?大家有无消息? +10 地理学1995 2024-06-24 14/700 2024-06-27 11:24 by jackiddd
[有机交流] 大佬们,打的核磁氢谱与chemdraw预测的有偏差 +7 来了个 2024-06-26 7/350 2024-06-27 11:11 by wubiansiya
[基金申请] 省基金太难了 +8 aasahr 2024-06-26 8/400 2024-06-27 10:35 by 小狮子2010
[硕博家园] 考博英语 +6 198新用户 2024-06-25 11/550 2024-06-27 10:13 by Bletilla
[基金申请] 国基在研影响申请结果吗 +13 WOWO159357 2024-06-26 21/1050 2024-06-27 09:44 by WOWO159357
[公派出国] CSC博士联培对将来就业有用吗 +5 也就这样 2024-06-22 5/250 2024-06-26 20:55 by tshenbin
[考研] 刚当完兵回来想考研 +7 五官在线 2024-06-23 18/900 2024-06-26 17:05 by 1158057902
[硕博家园] 博士该不该读? +8 L1009225316 2024-06-25 8/400 2024-06-26 16:26 by huixiong0627
[基金申请] 博后面上和特助今天出吗? +41 逗您玩 2024-06-21 78/3900 2024-06-26 16:00 by HAPPY_0225
[基金申请] 青年基金E02口青基去年几个函评专家? +6 他山攻玉之石 2024-06-25 9/450 2024-06-26 15:09 by 他山攻玉之石
[硕博家园] 申博雅思求助 +6 刘嘉研究究 2024-06-24 7/350 2024-06-26 07:08 by 小李醒yy
[基金申请] 焦虑没有毛线用,默默前行是王道! +4 漠上藜梭 2024-06-24 8/400 2024-06-25 14:32 by 漠上藜梭
[硕博家园] 数据不好 +5 Hetai 2024-06-23 7/350 2024-06-25 12:37 by 1591099
[教师之家] 有没有今年的影响因子? +6 jurkat.1640 2024-06-22 10/500 2024-06-24 22:48 by 潇湘之迷
[基金申请] 国自然资助比率是不是要下降了?? +8 今晚推荐22 2024-06-21 12/600 2024-06-24 11:15 by Pickfoot
[基金申请] 青年和面上,哪个上会难度更大 +12 今晚推荐22 2024-06-21 18/900 2024-06-24 11:08 by 半简体
信息提示
请填处理意见