24小时热门版块排行榜    

查看: 3390  |  回复: 18

lixingliang

新虫 (小有名气)

[交流] 为啥western有这么多条带 已有14人参与

我的实验流程是:先扩增带有Flag标签的基因,再转进293T细胞进行表达,然后做western验证蛋白表达情况,用的是Flag标签抗体,是单抗,所以很困惑,希望大家帮忙解答,谢谢。图一是目的蛋白,图二是内参GAPDH




PS:我的目的蛋白是入核蛋白

[ Last edited by lixingliang on 2011-11-8 at 23:22 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

我不管你看起看不起我,我都是个演员
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
wanhscn(金币+2): 鼓励交流! 2011-11-08 11:34:26
表达的蛋白大小不一,出现复合物或是部分降解,都能和单抗作用,于是…………
金币是赌出来的
2楼2011-11-08 09:58:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

丙氨酸密码子

新虫 (小有名气)

诡异,,
3楼2011-11-08 10:02:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lixingliang

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wjswj at 2011-11-08 09:58:34:
表达的蛋白大小不一,出现复合物或是部分降解,都能和单抗作用,于是…………

一个基因难道可以表达多种蛋白吗?这种可能性有多大呢,请指教
我不管你看起看不起我,我都是个演员
4楼2011-11-08 11:55:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mascotte

金虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流! 2011-11-08 20:16:52
不知道你的蛋白是什么。蛋白在细胞浆表达以后,是需要进行再加工的,这个蛋白叫做前体蛋白。该蛋白如果有入核信号或者膜定位信号或者线粒体定位信号就可以定位到相应的区域去,定位以后这些定位信号会被切除,成为成熟蛋白。如果蛋白在信号通路中被激活,被切割或被磷酸化等等,蛋白的分子量还会发生变化。所以如果不是抗体的问题(通常FLag抗体的特异性应该是不错的),这些条带可能和蛋白的功能相关。
5楼2011-11-08 12:16:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凡子1985

银虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
amisking(金币+1): 鼓励发帖交流! 2011-11-08 20:17:01
加未转染的细胞样做对照,看你的结果里还是有一条最亮的,不要想的太复杂,只可能是系统问题,不能是蛋白本身问题,western多么经典的实验啊
6楼2011-11-08 17:05:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Rubisco580

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
一抗的好坏也很重要的。据说一抗用牛奶配制,杂带会少点。就是封闭用的牛奶。
7楼2011-11-08 17:08:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

foreverjohn

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
可能是翻译后修饰哦,如磷酸化,或者糖基化等
8楼2011-11-08 18:03:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lixingliang

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by mascotte at 2011-11-08 12:16:28:
不知道你的蛋白是什么。蛋白在细胞浆表达以后,是需要进行再加工的,这个蛋白叫做前体蛋白。该蛋白如果有入核信号或者膜定位信号或者线粒体定位信号就可以定位到相应的区域去,定位以后这些定位信号会被切除,成为 ...

谢谢啊
我不管你看起看不起我,我都是个演员
9楼2011-11-08 23:20:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

helloluke

铁虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
一个基因当然可以表达多种蛋白。。比如病毒  所以要看你是什么基因咯 是单顺反子还是多顺反子
10楼2011-11-09 00:23:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 lixingliang 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +14 爱看书的可乐 2026-08-26 16/800 2026-08-26 19:21 by skyjudy
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 +3 晴天加油 2026-08-26 4/200 2026-08-26 17:59 by Tide man
[基金申请] 系统查不到 +10 董八千 2026-08-26 10/500 2026-08-26 16:30 by Equinoxhua
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +9 炎黄贵胄 2026-08-22 10/500 2026-08-26 15:40 by semaglutide
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +22 羊腰板 2026-08-21 25/1250 2026-08-26 15:00 by zuocuiping
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 今天务委会开完了,明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候,我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 明天应该可查了!? +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 22/1100 2026-08-25 15:36 by 医学老男孩
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
[教师之家] 导师吐槽:我怎么摊上了这么个极品研究生! +3 苏东坡二世 2026-08-23 3/150 2026-08-25 10:35 by shisan1313
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
信息提示
请填处理意见