应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 为啥western有这么多条带
191/2返回列表12下一页
查看: 3384  |  回复: 18
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

lixingliang

新虫 (小有名气)

[交流] 为啥western有这么多条带 已有14人参与

我的实验流程是：先扩增带有Flag标签的基因，再转进293T细胞进行表达，然后做western验证蛋白表达情况，用的是Flag标签抗体，是单抗，所以很困惑，希望大家帮忙解答，谢谢。图一是目的蛋白，图二是内参GAPDH




PS：我的目的蛋白是入核蛋白

[ Last edited by lixingliang on 2011-11-8 at 23:22 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
我不管你看起看不起我，我都是个演员
1楼 2011-11-08 09:47:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
wanhscn(金币+2): 鼓励交流！ 2011-11-08 11:34:26
表达的蛋白大小不一，出现复合物或是部分降解，都能和单抗作用，于是…………
赞一下(2人) 回复此楼
金币是赌出来的
2楼2011-11-08 09:58:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

丙氨酸密码子

新虫 (小有名气)
诡异，，
回复此楼
3楼2011-11-08 10:02:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lixingliang

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wjswj at 2011-11-08 09:58:34:
表达的蛋白大小不一，出现复合物或是部分降解，都能和单抗作用，于是…………

一个基因难道可以表达多种蛋白吗？这种可能性有多大呢，请指教
赞一下 回复此楼
我不管你看起看不起我，我都是个演员
4楼2011-11-08 11:55:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mascotte

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流！ 2011-11-08 20:16:52
不知道你的蛋白是什么。蛋白在细胞浆表达以后，是需要进行再加工的，这个蛋白叫做前体蛋白。该蛋白如果有入核信号或者膜定位信号或者线粒体定位信号就可以定位到相应的区域去，定位以后这些定位信号会被切除，成为成熟蛋白。如果蛋白在信号通路中被激活，被切割或被磷酸化等等，蛋白的分子量还会发生变化。所以如果不是抗体的问题（通常FLag抗体的特异性应该是不错的），这些条带可能和蛋白的功能相关。
赞一下(2人) 回复此楼
5楼2011-11-08 12:16:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凡子1985

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
amisking(金币+1): 鼓励发帖交流！ 2011-11-08 20:17:01
加未转染的细胞样做对照，看你的结果里还是有一条最亮的，不要想的太复杂，只可能是系统问题，不能是蛋白本身问题，western多么经典的实验啊
赞一下(2人) 回复此楼
6楼2011-11-08 17:05:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Rubisco580

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
一抗的好坏也很重要的。据说一抗用牛奶配制，杂带会少点。就是封闭用的牛奶。
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2011-11-08 17:08:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

foreverjohn

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
可能是翻译后修饰哦，如磷酸化，或者糖基化等
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2011-11-08 18:03:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lixingliang

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by mascotte at 2011-11-08 12:16:28:
不知道你的蛋白是什么。蛋白在细胞浆表达以后，是需要进行再加工的，这个蛋白叫做前体蛋白。该蛋白如果有入核信号或者膜定位信号或者线粒体定位信号就可以定位到相应的区域去，定位以后这些定位信号会被切除，成为 ...

谢谢啊
回复此楼
我不管你看起看不起我，我都是个演员
9楼2011-11-08 23:20:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

helloluke

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
一个基因当然可以表达多种蛋白。。比如病毒  所以要看你是什么基因咯 是单顺反子还是多顺反子
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2011-11-09 00:23:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 lixingliang 的主题更新
191/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 PbwVEMK5haaE 2026-08-25 5/250 2026-08-26 05:09 by cNXvBfCpiZOM
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 Qj98d49dHFb9 2026-08-25 5/250 2026-08-26 04:57 by cNXvBfCpiZOM
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 7K1CJE38xLG4 2026-08-25 4/200 2026-08-26 02:04 by cNXvBfCpiZOM
[基金申请] 有没有大神帮我看看基金代码 28+4 1234567wang 2026-08-24 10/500 2026-08-25 19:15 by lfy8008
[基金申请] 放榜前的不淡定 20+4 snowwithsea 2026-08-19 19/950 2026-08-25 17:57 by chick875
[基金申请] 某些机构，以效率低为荣，以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
[基金申请] 人气不行了 +11 fansofjerry 2026-08-21 11/550 2026-08-25 11:04 by 孤独的英雄6
[教师之家] 导师吐槽：我怎么摊上了这么个极品研究生！ +3 苏东坡二世 2026-08-23 3/150 2026-08-25 10:35 by shisan1313
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +5 process2012 2026-08-23 7/350 2026-08-25 09:42 by huixian257
[基金申请] 我面上完蛋了 +13 且听虎啸 2026-08-20 14/700 2026-08-25 09:10 by mrkang
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +7 炎黄贵胄 2026-08-22 8/400 2026-08-25 08:48 by ZJTJZ
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +21 koalala 2026-08-24 24/1200 2026-08-24 19:25 by 家与远方
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +14 ziyangfang 2026-08-19 17/850 2026-08-24 18:37 by 哈哈蛤？
[基金申请] 科研孤儿太难了 +18 我4大白菜 2026-08-20 19/950 2026-08-24 09:47 by 凯恩广盛催化分�
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办？ +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 今天放榜吗？ +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 看来今天不会放榜了？ +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭