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BIO-che

新虫 (小有名气)

[求助] 酶的纯化问题

在下,目前正在纯化一个酸性酶,用离子交换层析去纯化,结果发现纯化出来的结果,跑电泳出现了6-7条带,并且靠得很近,这样下一步,很难处理,老师想让我用纯化后的蛋白质再去让同一根离子柱,该怎么办??各位大侠帮忙一下!!!
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dasheng1980

铁杆木虫 (知名作家)

大圣


wanhscn(金币+1): 鼓励交流! 2011-11-11 21:40:56
7楼的说的不错,我也建议用一下疏水!
dasheng1980
9楼2011-11-11 19:40:01
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查看全部 9 个回答

江南

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励积极应助! 2011-11-05 15:08:21
问题说的不大清楚:是用的阴离子交换层析还是阳离子交换层析?缓冲液是什么?pH是多少? 可以按老师说的做一下,或者改变pH条件试一下,有条件的话可以把这7条带质谱鉴定一下……
2楼2011-11-05 00:40:01
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BIO-che

新虫 (小有名气)

是用阴离子柱,PH 5.0 用醋酸缓冲液,但是已经用阴离子柱纯化后的蛋白质 去变化缓冲液的PH,再去上同一根柱子会有效果吗?
3楼2011-11-05 12:10:01
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

★ ★ ★ ★
西瓜(金币+4): Good!高手出手了! 2011-11-06 00:05:08
不会再有更纯的效果的,除非把你上次的收集管分开,比如1-10都有酶活力,如果把1和10合并再上,那么就有效果,但不一定会比酶活力最高的3(打比方)更加纯。如果把1-10合并再上,无效果。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
4楼2011-11-05 22:56:04
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