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oceanworld木虫 (小有名气)
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BAC文库连接转化
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| 请问一下，做BAC文库构建时，为什么大片段超过100K的总是连不上去呢，转化后经NotI酶切检测，片段大小都在30k左右，按照说明书上的步骤进行的连接，可是为什么大片段总是连不上呢？求各位帮忙！！！！谢谢 |
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brightfuture01
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看样子你是在普通凝胶电泳上分离的30-150kb的DNA了，不知道你看过些什么文献是这样做的。普通的凝胶电泳分不开的，所以你回收的DNA里面含有大量的小片段，这些小片段在连接的时候需要的能量少，能优先连接上，所以你连进去的全是小片段。
7楼2011-11-05 12:30:14
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2楼2011-11-03 11:55:05
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3楼2011-11-03 13:36:58
oceanworld
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