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forever909

银虫 (小有名气)

[求助] Marker跑不开是怎么回事啊

最近在做WB,一开始时候一直做的是大分子量的蛋白(220)现在要做小分子量的蛋白(25)才发现我的marke跑不开的,就是14-100的marker最下面的那两个条带总是黏在一起,我的实验条件伯乐的电泳仪,60V,2h,marker上样5ul,胶的浓度10%,12%都试过了,Bic,AP都是重新配的,请各位帮帮忙,看看是什么问题,等着结果毕业了,在这先谢谢了
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lifuzhu3838

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖应助! 2013-07-12 01:38:26
我经常跑小分子的蛋白,用15%的胶,分离胶时电压加大一点100V-120V,电泳液重新配制,肯定分离的好。
活到老学到老
7楼2013-07-10 10:58:42
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416114799

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
① 胶浓度太高;② 电压太低。。
做人做事要低调,默默践行心中的梦想.
8楼2013-07-10 11:34:13
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普通回帖

bleach060452

新虫 (小有名气)

既然等着这个结果毕业,可以换个牌子的marker试试
岂能尽如人意,但求无愧我心
2楼2013-07-10 09:31:56
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forever909

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bleach060452 at 2013-07-10 09:31:56
既然等着这个结果毕业,可以换个牌子的marker试试

我觉得应该不是marker的问题,因为实验室其他的人说她的可以跑开的
快乐是最重要的。。。。。。
3楼2013-07-10 09:42:19
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zhsha1993

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
很有肯能是缓冲液的问题 自己重新配
4楼2013-07-10 10:14:17
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bleach060452

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by forever909 at 2013-07-10 09:42:19
我觉得应该不是marker的问题,因为实验室其他的人说她的可以跑开的...

她说可以跑开,究竟跑成什么样,你亲自看了没有?

你说的25是KD?我原来跑17 KD的,marker分的挺好的
岂能尽如人意,但求无愧我心
5楼2013-07-10 10:15:18
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微笑莫凝汐

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
marker跑不开有可能是缓冲液的原因 还有就是你配的胶的浓度不对
6楼2013-07-10 10:49:45
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zx1984

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-07-11 12:22:40
用15%的胶,堆积胶90V,分离胶120V,应该问题不大,我用12%的也可以分开。要是有条件用5%或7%~20%的梯度胶更好。
9楼2013-07-11 08:12:55
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guomimi

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
跑胶时间,胶浓度,缓冲液更换新的,注意浓度,电压,电流。
10楼2013-07-11 15:01:19
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