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huifengnayan

铜虫 (初入文坛)

[求助] marker 跑成这样是怎么个情况

marker 跑成这样是怎么个情况,下面越来越宽,跑了16分钟
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121112111211

木虫 (小有名气)

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huifengnayan(金币+1): ★★★很有帮助 2011-12-28 21:05:44
可能情况:胶制的不好,不太均匀
   可能上样量大小的问题
可能是Marker本身有降解
可能电压不稳定或者电泳缓冲液的使用时间太长了
Fighting!
2楼2011-12-27 19:27:15
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sysw

银虫 (小有名气)

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极有可能是你在做胶的时候可能胶已经有点冷了,开始凝固了吧,你倒下去以后就不太均匀了。
3楼2011-12-28 10:38:42
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dlcs100

铁虫 (初入文坛)

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huifengnayan(金币+1): ★★★很有帮助 2011-12-28 21:05:30
可能是marker性能不好。每个预染蛋白条带分子量稍微有些差异,不是完全的一致,所以中、小分子量marker会有梯形改变(大分子量也不是绝对的条带,跑低一点浓度的分辨率低的胶就可以看出来),为相差不多的markers造成(如果marker稍有降解就更明显了)。我是这么理解的:中小分子量更容易受到影响。比如1kd的差异,对于14.4kd的marker影响就很大导致条带迁移不均形成梯形;对于117kd的marker则影响很小,1kd的差异胶上是很难反映出来的。若为彩色marker因均一性好则很少出现这种情况,都是一条线。
www.dlcs100.com
4楼2011-12-28 11:23:18
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xiaochun6093

金虫 (小有名气)

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胶没制好的吧,需要琼脂糖充分溶解摇匀,然后再倒!琼脂糖浓度可以再稍微大一点试试
5楼2011-12-28 12:25:17
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

我也做出过“NIKE”(姑且这么叫吧)形状的电泳结果,当时是做的PCR产物。后来分析原因,觉得还是凝胶浓度不均匀造成的,主要是化胶后没有摇动均匀或者倒胶前已有部分凝固。希望对你有帮助。
6楼2011-12-28 15:37:09
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c20050566

银虫 (正式写手)

我感觉是胶的问题.
我的人生理想——做一名科学家。
7楼2011-12-29 02:15:09
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zyb880117

金虫 (正式写手)

电泳buffer次数跑得多了就会出现带越跑越宽的现象
8楼2011-12-29 16:09:00
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youlinp

金虫 (小有名气)

绝对是胶的问题,条带很清晰啊.
作胶一定要多摇几遍,别偷懒.
再做一遍肯定没问题的,呵呵
惠人达己,守正出奇
9楼2011-12-30 09:37:05
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大轰炸

金虫 (正式写手)

您的可能真多啊。。。。。
10楼2011-12-30 09:42:37
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