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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】小弟提的江珧DNA跑琼脂糖是这样的 师兄师姐们给分析一下
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新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】小弟提的江珧DNA跑琼脂糖是这样的 师兄师姐们给分析一下 已有5人参与

小弟刚刚接触 很多东西不懂 用酚氯仿法提江珧贝的DNA总是不成功 紫外分光测得浓度都在500-600ng/ul OD值1.8-2.3之间 但是跑琼脂糖跑不出来 请师兄师姐给分析一下下一步怎么弄
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1楼 2010-11-14 20:46:55
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dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人，我型我秀！

优秀版主
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人生不过几十年，成败荣辱都在天，是非恩怨莫在意，健康快乐最值钱，自古人间苦无边，看得高远境如仙，愿你不为凡事恼，轻松快乐每一天。
2楼2010-11-14 20:49:47
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新虫 (初入文坛)
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Originally posted by dhd997 at 2010-11-14 20:49:47:
中间的是Maker

是的啊 marker有问题吗？
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3楼2010-11-14 20:51:25
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

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呵呵，全切断了或者降解了，smear了。提取的时候轻柔点儿，枪头剪掉。
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
4楼2010-11-14 20:51:28
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新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2010-11-14 20:51:28:
呵呵，全切断了或者降解了，smear了。提取的时候轻柔点儿，枪头剪掉。

用的枪头也剪掉过了 您知道为什么还能跑出一些小的带来么？
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5楼2010-11-14 20:53:33
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

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呵呵，你得标上marker大小啊。
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6楼2010-11-14 21:11:03
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新虫 (初入文坛)
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Originally posted by brightfuture01 at 2010-11-14 21:11:03:
呵呵，你得标上marker大小啊。

从上到下2000 1000 750 500 250 100
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7楼2010-11-14 21:18:00
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pushizi

木虫 (小有名气)

pushizi
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用过RNA酶处理过么？看2道，5道，-1道可能还行，其他的可能真是降解了
先用RNA酶处理下吧。
还有，基因组应该很大吧，怎么能用2000 bp的marker呢？换个大点的，然后多跑一会。你看-5孔里还有东西没跑出来呢，很有可能就是，2000 bp的才跑到那，这跑的时间太短了
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但愿快乐不停歇，悲伤不再来~
8楼2010-11-14 22:30:21
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

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genomic DNA 你好歹也用 lamda DNA/HindIII做marker啊。2kb给好些PCR产物marker 都不合适的。
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9楼2010-11-15 02:47:54
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新虫 (初入文坛)
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Originally posted by pushizi at 2010-11-14 22:30:21:
用过RNA酶处理过么？看2道，5道，-1道可能还行，其他的可能真是降解了
先用RNA酶处理下吧。
还有，基因组应该很大吧，怎么能用2000 bp的marker呢？换个大点的，然后多跑一会。你看-5孔里还有东西没跑出来呢，很 ...

准备用这次提取先用RNA酶处理一下  marker暂时就这一个 那我多跑一会吧
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10楼2010-11-15 09:37:45
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