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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 【求助/交流】SSR结果为什么跑成这样，各位高手给指点一下
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阿德54007

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】SSR结果为什么跑成这样，各位高手给指点一下 已有14人参与

PCR产物，经95°变性后，跑6%的丙烯酰胺胶。电泳结束后，银染10min。漂洗两次，显色20min。但是实验结果一直不理想。以前师兄也是这么做的，但是效果要比这个好。不知原因出在哪里，希望各位兄弟姐们给出个主意，改进一下，小弟不胜感激。




[ Last edited by 阿德54007 on 2011-2-24 at 21:49 ]
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阳光温热，岁月静好，你还没来，我怎敢老
1楼 2011-02-24 21:48:01
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粥香可爱

铜虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1): 感谢参与 2011-02-26 09:07:00
不知道你跑的是大片段还是小片段，我觉得可以稍稍提高胶浓度，至高到8%试试看
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莫负家国与红颜
2楼2011-02-25 00:42:07
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阿德54007

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 粥香可爱 at 2011-02-25 00:42:07:
不知道你跑的是大片段还是小片段，我觉得可以稍稍提高胶浓度，至高到8%试试看

跑的片段不大，就是跑出来的条带有拖带，不整齐，有的接近圆点了。
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阳光温热，岁月静好，你还没来，我怎敢老
3楼2011-02-25 09:17:38
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粥香可爱

铜虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1): 鼓励交流 2011-02-26 09:07:13
银染的时间稍微较少点吧，看看5到7分钟可不可以。用低电压跑的时间长点试试。
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莫负家国与红颜
4楼2011-02-25 23:42:57
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jackplane

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 粥香可爱 at 2011-02-25 23:42:57:
银染的时间稍微较少点吧，看看5到7分钟可不可以。用低电压跑的时间长点试试。

换电泳液，低电压
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5楼2011-02-26 10:12:12
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阿德54007

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by jackplane at 2011-02-26 10:12:12:
换电泳液，低电压

我每次都用新的电泳液，我都是30W恒功率跑，电压在300V左右波动。
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阳光温热，岁月静好，你还没来，我怎敢老
6楼2011-02-26 10:15:14
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green1223

木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
电压用220即可  换电泳液用1倍的电泳液
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7楼2011-02-26 11:22:50
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mzjdnr

银虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+1): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-03-07 19:54:54
低压200伏左右，点样量减少些。
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8楼2011-02-26 13:13:24
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dingxiuying

木虫 (正式写手)
★
rainwander(金币+1): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-03-07 19:54:59
上样量减少，染色时间缩短试试。我看是染色太深了。终止染色后多洗几次。
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我喜欢默默地被你注视默默地注视着你，我喜欢深深地被你爱着深深地爱着你
9楼2011-03-07 16:36:48
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henrylee223

新虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1): 感谢交流 2011-03-15 12:26:06
背景太深 ，染色时间 5-7分钟足以
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10楼2011-03-14 22:07:26
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