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两种引物的PCR电泳图，做了多次还是不解
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下面我的PCR电泳图，彩色图第一个是Marker，诚然Marker跑得不好，买来直接用，可是每次都跑不开。 因为我做的是T-RFLP即末端限制性酶切技术，所以用的是带荧光的引物，选择时我参考的文献人家也选择的这样的，P出的片段大约是1.5KB，左起第2,3个是DNA的PCR，4,5是空白，可是为什么有条带，做了很多次都这样。后面四个是用另一种引物做的，不带荧光，P出的片段是100多bp，靠右边两个是空白。 不知道有没有人也是做T-RFLP的，能否传授些宝贵经验，后面就是要切割胶片进行纯化，然后对PCR产物进行酶切，可是PCR这是做不好，下面一直无法进行下去。 附上之前做过的黑白图，用的是带荧光的引物做的，每次都呈现这样的图，之前我也没观察颜色的不同，一直解不开谜团。这样分析的话是不是跑得比较慢的是我需要的片段呢，如何去除不需要的荧光片段呢？   [ Last edited by 树宝宝zyx on 2011-10-16 at 12:30 ] |
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10楼2011-10-17 13:02:11
doublehelix
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