应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 两种引物的PCR电泳图，做了多次还是不解
51/1返回列表
查看: 3888  |  回复: 18
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

树宝宝zyx

新虫 (小有名气)

[求助] 两种引物的PCR电泳图，做了多次还是不解

下面我的PCR电泳图，彩色图第一个是Marker，诚然Marker跑得不好，买来直接用，可是每次都跑不开。
    因为我做的是T-RFLP即末端限制性酶切技术，所以用的是带荧光的引物，选择时我参考的文献人家也选择的这样的，P出的片段大约是1.5KB，左起第2,3个是DNA的PCR，4,5是空白，可是为什么有条带，做了很多次都这样。后面四个是用另一种引物做的，不带荧光，P出的片段是100多bp，靠右边两个是空白。
   不知道有没有人也是做T-RFLP的，能否传授些宝贵经验，后面就是要切割胶片进行纯化，然后对PCR产物进行酶切，可是PCR这是做不好，下面一直无法进行下去。
  附上之前做过的黑白图，用的是带荧光的引物做的，每次都呈现这样的图，之前我也没观察颜色的不同，一直解不开谜团。这样分析的话是不是跑得比较慢的是我需要的片段呢，如何去除不需要的荧光片段呢？







[ Last edited by 树宝宝zyx on 2011-10-16 at 12:30 ]
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

【分子生物】EPI帖

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
科研真辛苦！
1楼 2011-10-16 12:13:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mamadexiao

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
树宝宝zyx(金币+5): 2011-10-16 20:01:19
西瓜(金币+3, MolEPI+1): 分析很有条理！ 2011-10-16 23:56:25
1.胶可能没凝好
2.电泳液该换了
3.你的电泳液和你的溶胶的缓冲液是不是一个体系
4.还有就是你可以稍稍提高下琼脂糖的浓度。。。
赞一下(2人) 回复此楼
5楼2011-10-16 14:39:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 19 个回答

doublehelix

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
树宝宝zyx(金币+3): 2011-10-16 20:01:09
西瓜(金币+2): good 2011-10-16 23:48:46
如果marker跑的都不清楚，还是建议LZ先弄清电泳问题出在哪？再来分析自己的样品，问题一步步来排除.......marker这么模糊，感觉凝胶配置有问题 ，电泳缓冲液与配胶缓冲液是否一致呢 ？
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-10-16 13:58:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by doublehelix at 2011-10-16 13:58:56:
如果marker跑的都不清楚，还是建议LZ先弄清电泳问题出在哪？再来分析自己的样品，问题一步步来排除.......marker这么模糊，感觉凝胶配置有问题 ，电泳缓冲液与配胶缓冲液是否一致呢 ？

和楼上一样的建议
赞一下 回复此楼
4楼2011-10-16 14:33:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liukgg

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
树宝宝zyx(金币+2): 2011-10-16 20:01:40
西瓜(金币+2): 第一次听说，学习了！ 2011-10-16 23:56:02
除了楼上的建议外，将胶后染试一下，染色剂可能对DNA的构象有影响
赞一下(1人) 回复此楼
山水凤凰
6楼2011-10-16 18:32:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 19 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 8/400 2026-09-01 12:58 by ssyjh
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +13 Kittylucky 2026-08-27 14/700 2026-09-01 11:06 by feng6531
[论文投稿] 小白求助 投论文要求的highlights应该如何写 5+3 l1963982152 2026-08-29 4/200 2026-09-01 09:04 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 能否申诉？ +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 基金不中，共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜？ 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 我不理解！ +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？ +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 牛来！米来！面来！ +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭