应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 两种引物的PCR电泳图，做了多次还是不解
51/1返回列表
查看: 3869  |  回复: 18
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

树宝宝zyx

新虫 (小有名气)

[求助] 两种引物的PCR电泳图，做了多次还是不解

下面我的PCR电泳图，彩色图第一个是Marker，诚然Marker跑得不好，买来直接用，可是每次都跑不开。
    因为我做的是T-RFLP即末端限制性酶切技术，所以用的是带荧光的引物，选择时我参考的文献人家也选择的这样的，P出的片段大约是1.5KB，左起第2,3个是DNA的PCR，4,5是空白，可是为什么有条带，做了很多次都这样。后面四个是用另一种引物做的，不带荧光，P出的片段是100多bp，靠右边两个是空白。
   不知道有没有人也是做T-RFLP的，能否传授些宝贵经验，后面就是要切割胶片进行纯化，然后对PCR产物进行酶切，可是PCR这是做不好，下面一直无法进行下去。
  附上之前做过的黑白图，用的是带荧光的引物做的，每次都呈现这样的图，之前我也没观察颜色的不同，一直解不开谜团。这样分析的话是不是跑得比较慢的是我需要的片段呢，如何去除不需要的荧光片段呢？







[ Last edited by 树宝宝zyx on 2011-10-16 at 12:30 ]
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

【分子生物】EPI帖

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
科研真辛苦！
1楼 2011-10-16 12:13:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by doublehelix at 2011-10-16 13:58:56:
如果marker跑的都不清楚，还是建议LZ先弄清电泳问题出在哪？再来分析自己的样品，问题一步步来排除.......marker这么模糊，感觉凝胶配置有问题 ，电泳缓冲液与配胶缓冲液是否一致呢 ？

和楼上一样的建议
赞一下 回复此楼
4楼2011-10-16 14:33:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 19 个回答

doublehelix

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
树宝宝zyx(金币+3): 2011-10-16 20:01:09
西瓜(金币+2): good 2011-10-16 23:48:46
如果marker跑的都不清楚，还是建议LZ先弄清电泳问题出在哪？再来分析自己的样品，问题一步步来排除.......marker这么模糊，感觉凝胶配置有问题 ，电泳缓冲液与配胶缓冲液是否一致呢 ？
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-10-16 13:58:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mamadexiao

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
树宝宝zyx(金币+5): 2011-10-16 20:01:19
西瓜(金币+3, MolEPI+1): 分析很有条理！ 2011-10-16 23:56:25
1.胶可能没凝好
2.电泳液该换了
3.你的电泳液和你的溶胶的缓冲液是不是一个体系
4.还有就是你可以稍稍提高下琼脂糖的浓度。。。
赞一下(2人) 回复此楼
5楼2011-10-16 14:39:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liukgg

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
树宝宝zyx(金币+2): 2011-10-16 20:01:40
西瓜(金币+2): 第一次听说，学习了！ 2011-10-16 23:56:02
除了楼上的建议外，将胶后染试一下，染色剂可能对DNA的构象有影响
赞一下(1人) 回复此楼
山水凤凰
6楼2011-10-16 18:32:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 19 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +26 yaoyewhu2008 2026-08-20 28/1400 2026-08-26 13:49 by zzuzxg
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +4 yuleib84 2026-08-26 5/250 2026-08-26 13:40 by yuleib84
[基金申请] 怎么查啊 +4 huang1991js 2026-08-26 4/200 2026-08-26 11:26 by panjy.cn
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +4 叶九微 2026-08-26 4/200 2026-08-26 10:52 by xiacongxu
[基金申请] 今天务委会开完了，明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[职场人生] 学生撞见辅导员送外卖，第二天全班都沉默了 +3 鲸鱼融金_浙江_� 2026-08-22 3/150 2026-08-26 09:01 by zzuzxg
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？ +24 木水思豆 2026-08-25 27/1350 2026-08-26 08:26 by yanchen918
[基金申请] 明天应该可查了！？ +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
[基金申请] 有没有大神帮我看看基金代码 28+4 1234567wang 2026-08-24 10/500 2026-08-25 19:15 by lfy8008
[基金申请] 今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 22/1100 2026-08-25 15:36 by 医学老男孩
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
[基金申请] 我面上完蛋了 +13 且听虎啸 2026-08-20 14/700 2026-08-25 09:10 by mrkang
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +13 大萍1987 2026-08-20 16/800 2026-08-24 10:23 by 太傻了
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭