24小时热门版块排行榜    

查看: 2621  |  回复: 9
本帖产生 1 个 MolEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

bluysky0902

金虫 (正式写手)

[求助] PCR扩增不出条带

模板:2个莲雾品种,
   品种a的检测结果:含量908.1ng/µL,    A260:18.161,A280:10.219,A260/A280=1.78,A260/A230=1.04
     品种b的检测结果:含量610.2ng/µL, A260:12.203,A280:6.807,A260/A280=1.79,A260/A230=1.18

PCR体系:模板的量60ng,其他反应成分为标准加样(成熟体系,其他树种做没有问题)

引物:ISSR随机引物(随机用了10条)

结果:白板

原因:为什么啊?????
   个人认为是模板的问题,因为以前的时候,在其他个别品种(其他树种)也有发生过类似的情况,总是扩不出来,后来又把模板重新纯化(Tris酚)了一遍才扩出来,但模板损失量会很大,这次就是想问问虫友们,到底是什么原因造成的?除纯化之外,还有其他解决的方式吗?唉,头大。。。
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

【分子生物】EPI帖 核酸与基因生物学

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王玉民

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

bluysky0902(金币+2): 2011-10-15 09:34:18
反应条件呢?优化反应条件试试啊!
心晴
4楼2011-10-14 08:14:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

doublehelix

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

bluysky0902(金币+5): 2011-10-13 22:40:08
wanhscn(MolEPI+1): 根据楼主反映,理应授予专家指数! 2011-10-14 18:05:25
植物的没做过,微生物的倒常做,随便提出的DNA扩增十有八九都会成功,DNA质量仅是一个方面。LZ其它条件没说 ,但感觉模板量太多了,50ul体系有个10ng足亦
2楼2011-10-13 21:28:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bluysky0902

金虫 (正式写手)

我也是觉得应该随便扩都能扩出来的,最近试验真不顺利~我再稀释下模板扩下试试,死马当活马医了~
3楼2011-10-13 22:39:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bluysky0902

金虫 (正式写手)


西瓜(金币+1): 鼓励反馈!慢慢做,一定会有结果的哈! 2011-10-15 20:06:30
跟反应条件应该关系不大,昨天把DNA重新稀释为低浓度,做了个梯度,仍然是白板,看来要不重提DNA,要不就纯化DNA了,谢谢各位~
5楼2011-10-15 09:34:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 23jxep3nCNZb 2026-09-14 3/150 2026-09-15 01:21 by mibUvS8DDCwf
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 00:12 by vZfe6xYu34yj
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-14 23:45 by vZfe6xYu34yj
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 3/150 2026-09-14 23:21 by vZfe6xYu34yj
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 5/250 2026-09-14 22:45 by vZfe6xYu34yj
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 6/300 2026-09-14 22:37 by vZfe6xYu34yj
[找工作] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-14 22:13 by vZfe6xYu34yj
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-14 22:00 by vZfe6xYu34yj
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-14 21:33 by vZfe6xYu34yj
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-14 21:25 by vZfe6xYu34yj
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-14 21:24 by vZfe6xYu34yj
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 7/350 2026-09-14 21:21 by vZfe6xYu34yj
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组招收博士研究生 +4 两三岁ss 2026-09-14 4/200 2026-09-14 20:29 by 班主任的同桌
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-14 18:01 by Aj1rhIDL5ixY
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:13 by Aj1rhIDL5ixY
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:37 by Aj1rhIDL5ixY
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 15:09 by Aj1rhIDL5ixY
[找工作] 浙江师范大学是怎么坑我的 +6 recruit123 2026-09-09 6/300 2026-09-14 12:00 by 萨仁其其格
[考博] 西北工业大学材料学院电化学传感与催化课题组招收2027年推免研究生、博士生、博士后 +3 马方园 2026-09-10 4/200 2026-09-14 09:29 by Chem张zz
[教师之家] 浙江师范大学是怎么坑我的 +10 recruit123 2026-09-09 15/750 2026-09-13 10:45 by seaskyy
信息提示
请填处理意见