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jm0305100303新虫 (小有名气)
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[求助]
已经带his标签目的蛋白基因如何设计引物啊（目的基因已经接在pET-22b的载体上了）
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分子生物学的新手，正学习设计引物，向各位大侠求助啊…… 利用pET-22b的重组质粒去pcr，希望得到带组氨酸标签的目的蛋白基因，因为组氨酸标签用的是CAC，所以设计出来的引物GC%偏高（66.7%），Tm值79.2(上游引物的tm值才56.7，差20多度……)，引物里面就是保护碱基（3bp）+酶切位点（6bp）+终止密码子（3bp）+5个GTG（15bp）的重复，一共27个bp，不知道这样的引物能不能p出目的基因来啊，如果能p出来，退火温度应该用多少呢？ [ Last edited by jm0305100303 on 2011-9-19 at 13:09 ] |
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