| 查看: 2194 | 回复: 13 | |||
wuguangxia银虫 (初入文坛)
|
[交流]
酿酒酵母转化建立突变库 已有4人参与
|
|
各位虫友们好！有没有最近做酵母转化的，我想向各位大虾请教一下。 我最近做酵母转化这一块，但是需要很高的转化效率，达到一定的库容才行，也就是说建立一个突变文库，有没有人做过用连接产物直接转化酿酒酵母感受态的？？？ |
回复此楼» 猜你喜欢
上海工程技术大学张培磊教授团队招收博士生
已经有3人回复
-
上海工程技术大学【激光智能制造】课题组招收硕士
已经有5人回复
-
求助院士们，这个如何合成呀
已经有4人回复
-
临港实验室与上科大联培博士招生1名
已经有9人回复
-
想换工作。大多数高校都是 评职称时 认可5年内在原单位取得的成果吗？
已经有7人回复
-
需要合成515-64-0，50g，能接单的留言
已经有4人回复
-
自荐读博
已经有4人回复
-
写了一篇“相变储能技术在冷库中应用”的论文，论文内容以实验为主，投什么期刊合适？
已经有6人回复
-
带资进组求博导收留
已经有10人回复
-
最近几年招的学生写论文不引自己组发的文章
已经有11人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 酿酒酵母 大肠杆菌 枯草芽孢杆菌 八叠藤黄球菌 分别属于G+ 还是G-？
已经有3人回复
- 求助一个关于酿酒酵母转化的问题
已经有19人回复
- 酿酒酵母基因组PCR出了16S的条带
已经有8人回复
- 酿酒酵母同源重组时，同源臂上有突变还能重组成功么？
已经有6人回复
- 重组酿酒酵母转化子筛选的问题
已经有12人回复
- 求助酿酒酵母菌种选育方面的专家（项目合作）！急
已经有6人回复
- 急求酿酒酵母的电转感受态制备方法和转化方法
已经有13人回复
- 20金币 求助关于酿酒酵母的放大培养
已经有9人回复
- 【求助/交流】酿酒酵母URA3基因敲除的问题
已经有30人回复
- 【求助/交流】管囊酵母和酿酒酵母
已经有9人回复
- 【求助/交流】酿酒酵母利用半乳糖的问题
已经有13人回复
- 【求助/交流】酿酒酵母表达载体的构建问题
已经有6人回复
- 【求助/交流】酿酒酵母质粒转化大肠杆菌
已经有11人回复
- 【求助/交流】酿酒酵母drop-out的配置~~
已经有12人回复
- 【求助/交流】求助酿酒酵母转化
已经有3人回复
2楼2011-09-16 10:09:41
wuguangxia
银虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 432
- 散金: 28
- 红花: 2
- 帖子: 20
- 在线: 6.4小时
- 虫号: 1140984
- 注册: 2010-11-07
- 专业: 生物化学
3楼2011-09-18 20:21:20
4楼2011-09-19 10:01:52
墨香若水
木虫 (著名写手)
小小囧虫
- 应助: 15 (小学生)
- 金币: 3059.1
- 散金: 942
- 红花: 10
- 沙发: 1
- 帖子: 1408
- 在线: 255.2小时
- 虫号: 528502
- 注册: 2008-03-19
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
5楼2011-09-19 11:10:55
wuguangxia
银虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 432
- 散金: 28
- 红花: 2
- 帖子: 20
- 在线: 6.4小时
- 虫号: 1140984
- 注册: 2010-11-07
- 专业: 生物化学
6楼2011-09-21 21:08:23
7楼2011-09-21 22:19:28
wuguangxia
银虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 432
- 散金: 28
- 红花: 2
- 帖子: 20
- 在线: 6.4小时
- 虫号: 1140984
- 注册: 2010-11-07
- 专业: 生物化学
★ ★ ★ ★ ★
lstt09nk(金币+5): 感谢参与 2011-09-27 17:08:16
lstt09nk(金币+5): 感谢参与 2011-09-27 17:08:16
|
l)实验开始前两天，接种待转化的酵母菌株的单菌落于5mlYPD培养基中，30℃振荡培养过夜。 2)前一天晚上，取适量(5微升左右)的过夜培养液接种到30m1YPAD培养基，30℃振荡培养过夜，到细胞密度为 1x10，细胞/m1(0D60 =0.3一0.5)。为获得更高的转化效率，可用YPAD稀释培养液至细胞密度为 2x106细胞/m1，培养2~4h。 3)取1.2ml培养液在室温下3000g离心lmin，收集细胞。细胞用lml无菌水重 悬，室温下3000g离心lmin，沉淀细胞。 4)细胞用lml铿盐溶液(1体积10xTE缓冲液，1体积10x乙酸铿贮液，8体 积无菌超纯水，现配现用)重悬。 5)室温下3000g离心lmin，去上清，重新用0.2ml铿盐溶液重悬细胞，感受态 制备完毕。 |
8楼2011-09-22 09:54:05
wuguangxia
银虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 432
- 散金: 28
- 红花: 2
- 帖子: 20
- 在线: 6.4小时
- 虫号: 1140984
- 注册: 2010-11-07
- 专业: 生物化学
9楼2011-09-22 09:55:09
wuguangxia
银虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 432
- 散金: 28
- 红花: 2
- 帖子: 20
- 在线: 6.4小时
- 虫号: 1140984
- 注册: 2010-11-07
- 专业: 生物化学
10楼2011-09-26 20:31:19