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madengyu

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xbl3688

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
dhd997(金币+2): 楼主奖励 2011-08-30 07:58:50
dhd997(金币+2): good 2011-08-30 07:58:58
1、你都没有设置阳性对照吗? 菌液PCR的时候这个很重要,如果阳性正常可以排除PCR体系和程序的问题。
2、你的问题的话,模板量是不是有点少,我是用200ul菌液离心,煮沸10分钟,加25ul灭菌水作为模板,25ul的体系加20ul。
3、另外一个这个退火温度是不是高了,一般是引物Tm值减去5左右。之前这个温度做出来过吗?不确定退火温度的话,不妨做个60-50℃的降落PCR。
生活的乐趣在于善于发现美,学会欣赏美
5楼2011-08-29 21:45:04
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

直接将内容贴出来以便应助。。。
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
2楼2011-08-29 19:47:49
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amisking

荣誉版主 (文坛精英)

优秀区长优秀版主

引用回帖:
2楼: Originally posted by 天使托 at 2011-08-29 19:47:49:
直接将内容贴出来以便应助。。。

我帮他编辑了
如果没有人帮助你,那么你就去帮助别人。
3楼2011-08-29 20:29:27
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liling77ll

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 楼主奖励 2011-08-30 07:58:40
跑菌液不需变性那么久的吧?还有保证菌液活的,感觉你菌液没加进去或者没活性,个人观点,呵呵
做最好的自己,和自己的昨天对比
4楼2011-08-29 21:16:47
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