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木虫 (小有名气)

[求助] 分子克隆连接问题！

本人最近想把一个用Xho I 和Nde I双酶切获得的基因片段连接到用同样的酶进行酶切完毕的PET28b（+）质粒中，上述两个酶的说明书（宝生物）说这两个酶进行酶切获得的片段需要按照平末端连接条件进行连接，小弟以前没做过克隆，跪求高手给出个连接条件吧，越详细越好，我都失败一周了。。。。

1楼 2011-08-26 21:33:45

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金虫 (正式写手)

★
西瓜(金币+1): 是的 2011-08-29 16:33:42
yitonghui(金币+1): 2011-10-07 21:31:22

片段怎么得到的，PCR扩出来酶切的还是直接从载体酶切得到的？如果是PCR得到的需要注意保护碱基的数量，粘性末端还是比较容易连的

a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?

9楼2011-08-28 21:16:43

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