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cib百里酚蓝

新虫 (小有名气)

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[求助] 为什么不同PCR仪扩增结果不同

在下最近做PCR,扩增某植物基因组的DNA，在国产仪器上扩出条带单一，产物量较少，同样的条件在进口仪器上却扩出很多非特异性条带，阴性对照也有条带，请高手指点一下该如何调一下条件

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相似者相溶

1楼 2011-08-24 16:50:14

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xbl3688

银虫 (正式写手)

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西瓜(金币+4): Good 2011-08-25 17:26:12

1、不同的机子、甚至同一台机子同样的程序还有可能出现不一样的结果；
2、扩出的条带比较浅可以做一个降落pcr，再用自己之前延伸的温度扩25个循环，这样结果应该会好点。也可以做梯度pcr摸索最佳延伸温度；
3、LZ第二次扩基因的时候阴性对照都有条带了，有可能操作过程体系污染了。模板量加多了也会出现杂带，或是条带不清晰的情况

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生活的乐趣在于善于发现美，学会欣赏美

7楼2011-08-25 15:26:12

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