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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 调制叶绿素荧光仪
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jdz19861029

铁虫 (初入文坛)

[交流] 调制叶绿素荧光仪

请问高人，野外条件对叶绿素荧光仪测得的数据是否影响很大，比如晴天上午八点和中午两点的数据是否差异很大？谢谢！
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1楼 2011-04-19 10:39:56
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amenda2

铜虫 (初入文坛)
★
jdz19861029(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
10楼: Originally posted by Maricy at 2012-10-09 16:03:39
大家好，急需知道叶绿素荧光参数如何设定？哪位专家给回复一下，谢谢

你好，叶绿素荧光测量其实很简单，如果仅是看植株是否收到胁迫，只需要测量QY（Fv/Fm）即可，测量时间仅用1s，设置为测量光1-4μmol/m2.S(有的仪器会用百分比表示，如PSI的手持式荧光仪就要设置为14%左右)，饱和光（F-pulse）尽量高些，2000μmol/m2.s。然后就可以测量了。
对于其他复杂的荧光参数如NPQ,Kausty等，不同的实验材料是不同的。想详细I知道的，再问我吧！
还要提醒的一点：一般的荧光参数测量之前，是都要进行暗适应的。时间大概在5-15min左右
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12楼2013-06-21 15:36:55
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henkally

禁虫 (著名写手)
★ ★
jdz19861029(金币+1):谢谢参与
reasonspare(金币+1): 请分享你的采样经验。 2011-04-19 12:10:45
本帖内容被屏蔽
2楼2011-04-19 11:27:05
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henkally

禁虫 (著名写手)
★ ★
amisking(金币+2, EPI+1): 鼓励发帖应助。 2011-04-19 19:51:34
jdz19861029(金币+2): 2011-04-19 21:16:58
其实不是制样的问题，因为是实时检测，所以体现当时环境（温度，光照强度）对植物光合速率的影响。我查了下调制叶绿素荧光仪的说明，摘录如下：

打开一个持续时间很短（一般小于1 s）的强光关闭所有的电子门（光合作用被暂时抑制），从而使叶绿素荧光达到最大。饱和脉冲（Saturation Pulse, SP）可被看作是光化光的一个特例。光化光越强，PS II释放的电子越多，PQ处累积的电子越多，也就是说关闭态的电子门越多，F越高。当光化光达到使所有的电子门都关闭（不能进行光合作用）的强度时，就称之为饱和脉冲。 　　打开饱和脉冲时，本来处于开放态的电子门将该用于光合作用的能量转化为了叶绿素荧光和热，F达到最大值。 　　经过充分暗适应后，所有电子门均处于开放态，打开测量光得到Fo，此时给出一个饱和脉冲，所有的电子门就都将该用于光合作用的能量转化为了荧光和热，此时得到的叶绿素荧光为Fm。根据Fm和Fo可以计算出PS II的最大量子产量Fv/Fm=(Fm-Fo)/Fm，它反映了植物的潜在最大光合能力。

　　在光照下光合作用进行时，只有部分电子门处于开放态。如果给出一个饱和脉冲，本来处于开放态的电子门将该用于光合作用的能量转化为了叶绿素荧光和热，此时得到的叶绿素荧光为Fm’。根据Fm’和F可以求出在当前的光照状态下PS II的实际量子产量Yield=ΦPSII=ΔF/Fm’=(Fm’-F)/Fm’，它反映了植物目前的实际光合效率。 　　在光照下光合作用进行时，只有部分电子门处于关闭态，实时荧光F比Fm要低，也就是说发生了荧光淬灭（quenching）。植物吸收的光能只有3条去路：光合作用、叶绿素荧光和热。根据能量守恒：1＝光合作用＋叶绿素荧光＋热。可以得出：叶绿素荧光＝1－光合作用－热。也就是说，叶绿素荧光产量的下降（淬灭）有可能是由光合作用的增加或热耗散的增加引起的。由光合作用的引起的荧光淬灭称之为光化学淬灭（photochemical quenching, qP）；由热耗散引起的荧光淬灭称之为非光化学淬灭（non-photochemical quenching, qN或NPQ）。光化学淬灭反映了植物光合活性的高低；非光化学淬灭反映了植物耗散过剩光能为热的能力，也就是光保护能力。

     我们用调制叶绿素荧光仪测，主要也是测Fm，Fo，Fv这些参数，现在的机器也很方便，都能直接测。LZ的情况是说早上8点和中午2点是否有差异？中午2点光照强度，温度都很高，荧光淬灭很高，这是主要的影响因素，肯定导致该时间点量子产率低。

[ Last edited by henkally on 2011-4-19 at 14:18 ]
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3楼2011-04-19 14:17:03
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jdz19861029

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by henkally at 2011-04-19 14:17:03:
其实不是制样的问题，因为是实时检测，所以体现当时环境（温度，光照强度）对植物光合速率的影响。我查了下调制叶绿素荧光仪的说明，摘录如下：

打开一个持续时间很短（一般小于1 s）的强光关闭所有的电子门（ ...

文献表明，温度和光照对光合作用影响很大，晴天条件下净光合速率为曲线，但一般植物若未受到胁迫，其光量子产率在0.8~0.84之间，感觉这个光量子产率应该为相对稳定的一个值。我没做过，也只是个人看法。欢迎回复，谢谢交流！
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4楼2011-04-19 21:16:41
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henkally

禁虫 (著名写手)
本帖内容被屏蔽
5楼2011-04-20 09:15:47
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Maricy

新虫 (初入文坛)
★
jdz19861029(金币+1): 谢谢参与
你好，首先很高兴认识你，最近我在做有关叶绿素荧光仪测苹果的实验，我想请问如何设置荧光参数？很期待你的回复哦，非常感谢
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8楼2012-10-09 10:33:45
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Maricy

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
1009562楼: Originally posted by henkally at 2011-04-20 09:15:47
看具体情况，夏季的下午2点时候的光强和温度（光强20000lux和30摄氏度），是能达到胁迫条件的，会影响光合效率。量子产率也是下降的。

我是在暗适应后测的，外界环境因素是一定的，
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9楼2012-10-09 10:37:42
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Maricy

新虫 (初入文坛)
大家好，急需知道叶绿素荧光参数如何设定？哪位专家给回复一下，谢谢
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10楼2012-10-09 16:03:39
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shichaoyi

金虫 (小有名气)
★
jdz19861029(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
3楼: Originally posted by henkally at 2011-04-19 14:17:03
其实不是制样的问题，因为是实时检测，所以体现当时环境（温度，光照强度）对植物光合速率的影响。我查了下调制叶绿素荧光仪的说明，摘录如下：

打开一个持续时间很短（一般小于1 s）的强光关闭所有的电子门（光 ...

你好，我最近在看Water-PAM的原理，其中有一些问题不太理解，请教您：
1、整个测量过程是不是测得都是测量光激发产生的荧光，也就是说整个过程测量光都是激发的？
2、光化光也是调制的吗？
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11楼2013-04-18 21:44:31
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amenda2

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
11楼: Originally posted by shichaoyi at 2013-04-18 21:44:31
你好，我最近在看Water-PAM的原理，其中有一些问题不太理解，请教您：
1、整个测量过程是不是测得都是测量光激发产生的荧光，也就是说整个过程测量光都是激发的？
2、光化光也是调制的吗？...

你好，叶绿素荧光的测量主要用到三种光：测量光，光化学光，饱和光。测量光是一种很微弱的光，用于测量本底荧光，一般用来测量Fo。1、光化学光的强度一般与植物生长环境光的强度接近，用来使植物正常进行光合作用。饱和光是一种强度非常强的光，他照射在植物叶片上时，会使光合电子传递链瞬间关闭，也就是光反应暂时终止。
这三种光是根据不同的荧光参数自动打开的，例如Fv/Fm测量室，先开启测量光，测得Fo，然后开启饱和光，测得Fm，然后软件根据测得的两个值计算Fv/Fm。
因此，整个测量过程并不仅仅有测量光，还会有光化学光和饱和光。
2、目前的荧光仪都是采用调制式的。
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13楼2013-06-21 15:49:04
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mball1314

新虫 (初入文坛)
★
jdz19861029(金币+1): 谢谢参与
你应该是买的我们公司的OS-3p，关于叶绿素荧光的帖子可以到这里查看，http://www.eco-online.cn/forum.php?mod=forumdisplay&fid=43
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14楼2014-03-26 17:13:47
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hentek

新虫 (初入文坛)
★
jdz19861029(金币+1): 谢谢参与
温度和光强都会影响荧光，至于具体情况，和样品种类也会有关系。可以自己做下试验来做影响曲线。
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15楼2014-06-05 11:10:14
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hentek

新虫 (初入文坛)
不同时间测量荧光数据的差别会比较大，就算间隔2分钟，也会有大的差别。
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16楼2014-06-23 11:02:59
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小狗一号

新虫 (初入文坛)
★
jdz19861029(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
12楼: Originally posted by amenda2 at 2013-06-21 15:36:55
你好，叶绿素荧光测量其实很简单，如果仅是看植株是否收到胁迫，只需要测量QY（Fv/Fm）即可，测量时间仅用1s，设置为测量光1-4μmol/m2.S(有的仪器会用百分比表示，如PSI的手持式荧光仪就要设置为14%左右)，饱和光 ...

您好，我想测干旱高温胁迫下小麦的叶绿素荧光和P700的氧化还原，P700充分氧化的半衰期以及830nm处吸光度变化，要怎么测呀，我用的是DUAL-PAM-100，谢谢
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17楼2015-03-18 16:13:04
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tangmin945

新虫 (初入文坛)
★
jdz19861029(金币+1): 谢谢参与
很大，植物生理机能在不同时间是不一样的，你测出来的数据肯定会有差异。
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18楼2015-04-08 15:51:39
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liujzh046楼
2011-04-20 09:25   回复  
jdz19861029(金币+1):谢谢参与
维维Vivi7楼
2011-04-20 09:34   回复  
jdz19861029(金币+1):谢谢参与
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