| 查看: 3891 | 回复: 8 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[求助]
设计引物时酶切位点保护碱基的问题
|
|||
|
我想在毕赤酵母表达蛋白，用的是pPTC9K，因为目标蛋白中有SnaBI和EcoRI,所以只能用两相邻的AvrII和NotI酶切位点。设计引物的时候找不到AvrII的保护碱基，求助。 同时也听师兄说保护碱基的格式是有规定的（http://wenku.baidu.com/view/e596a5dba58da0116c1749bf.html参照这个表）。但我之前设计引物的时候都是随便来的，像BamHI我只是象征性的添加几个GC，只要无发夹结构、二聚体就行了，而且也都能p出来。所以我困惑了，保护碱基到底有啥要求？必须按照那个表来，碱基数目及排列都必须一样？ 毕赤酵母组氨酸偏爱密码子为CAC，为减小引物Tm值我选用CAT可否，会影响表达效率么？ 求高手指导，最好能给个QQ进一步咨询。。。 [ Last edited by 肉丸001 on 2011-7-7 at 19:28 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有55人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
原核表达引物设计的问题
已经有6人回复- primer 5 设计引物的问题
已经有16人回复
- 载体构建技术请教，如何设计引物提取基因插入载体中？
已经有3人回复
- PCR引物设计的问题
已经有8人回复
- 单酶切连接的问题
已经有4人回复
- 关于PCR引物设计及添加酶切位点和保护碱基的问题
已经有4人回复
- 悬赏引物设计问题
已经有12人回复
- 分子克隆连接问题！
已经有12人回复
- 引物设计
已经有4人回复
- 关于设计ＧＦＰ的引物设计问题。专家请入内
已经有3人回复
- 做蛋白体外表达时的引物设计问题！
已经有12人回复
- 【专题】引入酶切位点的引物设计问题
已经有11人回复
- 克隆基因全长引物设计问题
已经有32人回复
天使托
专家顾问 (职业作家)
T.Shen
-
专家经验: +57 - MolEPI: 106
- 应助: 95 (初中生)
- 贵宾: 0.263
- 金币: 16382.3
- 散金: 593
- 红花: 74
- 沙发: 9
- 帖子: 3648
- 在线: 288.2小时
- 虫号: 441757
- 注册: 2007-10-27
- 专业: 微生物生理与生物化学
- 管辖: 微生物
4楼2011-07-07 20:55:48