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ppic9k质粒双酶切
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qwky2010
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虫号: 464843
[交流]
ppic9k质粒双酶切
我用这个9k质粒发现,双酶切后质粒跑的比没有酶切时还要快,这样正常吗,谢谢了
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2011-06-25 16:59:46
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lxj341401
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dhd997(金币+5, EPI+1): 一并奖励 2011-06-27 16:20:38
引用回帖:
Originally posted by
qwky2010
at 2011-06-25 21:50:59:
我的酶量均加入3ul,质粒加入36ul,buf加了5ul,共50ul体系,37度12h,如果说是加酶量过多 ,我要重新再提取质粒,然后再减少酶量进行双酶切吗
[
Last edited by qwky2010 on 2011-6-25 at 22:05
]
太多了,酶的量不能超过体积的10%,多了里面的甘油就多了,出现星号活力,而且你酶切时间也太长了。
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8楼
2011-06-26 07:52:01
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lxj341401
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qwky2010(金币
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):谢谢参与
西瓜(金币+2): 欢迎交流。顺便请教下,具体怎么说呢? 2011-06-25 18:24:46
看你用的是什么酶了。
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qwky2010
2楼
2011-06-25 17:19:16
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qwky2010(金币
+1
):谢谢参与
以前有人讨论过这个问题,酶切后的质粒有时候是会比没有切的跑得更快。跟Marker比较下,大小对了就没问题了。
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3楼
2011-06-25 18:20:42
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Originally posted by
lxj341401
at 2011-06-25 17:19:16:
看你用的是什么酶了。
谢谢你昨天和今天的回复,我用的是not1和ecoR1这两个酶,体系是你昨天发给我的,不知道该怎么办,多多指点谢谢~
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4楼
2011-06-25 20:49:23
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