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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » ppic9k质粒双酶切
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qwky2010

金虫 (著名写手)

[交流] ppic9k质粒双酶切

我用这个9k质粒发现，双酶切后质粒跑的比没有酶切时还要快，这样正常吗，谢谢了
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1楼 2011-06-25 16:59:46
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★
dhd997(金币+5, EPI+1): 一并奖励 2011-06-27 16:20:38
引用回帖:
Originally posted by qwky2010 at 2011-06-25 21:50:59:
我的酶量均加入3ul，质粒加入36ul,buf加了5ul,共50ul体系，37度12h，如果说是加酶量过多 ，我要重新再提取质粒，然后再减少酶量进行双酶切吗

[ Last edited by qwky2010 on 2011-6-25 at 22:05 ]

太多了，酶的量不能超过体积的10%，多了里面的甘油就多了，出现星号活力，而且你酶切时间也太长了。
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8楼2011-06-26 07:52:01
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★ ★ ★
qwky2010(金币+1):谢谢参与
西瓜(金币+2): 欢迎交流。顺便请教下，具体怎么说呢？ 2011-06-25 18:24:46
看你用的是什么酶了。
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qwky2010
2楼2011-06-25 17:19:16
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★
qwky2010(金币+1):谢谢参与
以前有人讨论过这个问题，酶切后的质粒有时候是会比没有切的跑得更快。跟Marker比较下，大小对了就没问题了。
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3楼2011-06-25 18:20:42
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qwky2010

金虫 (著名写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
Originally posted by lxj341401 at 2011-06-25 17:19:16:
看你用的是什么酶了。

谢谢你昨天和今天的回复，我用的是not1和ecoR1这两个酶，体系是你昨天发给我的，不知道该怎么办，多多指点谢谢~
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4楼2011-06-25 20:49:23
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