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bear0329金虫 (正式写手)
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[求助]
16srDNA PCR扩增问题，帮忙分析下原因
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PCR体系： 总体积 30 μl 10×Buffer 3 μl dNTP(0.25 mM) 1.5 μl Taq DNA polymerase 0.3 μl 27F(25μM) 1 μl 907R(25μM) 1 μl BSA 0.2 μl 模板DNA 1 μl ddH2O 22 μl PCR程序： 94℃预变性3min，94℃变性45s，50℃退火45s，72℃延伸90s，32个循环，72℃延伸10min。 PCR结果：  昨天根据虫友的分析，我将dNTP由原来的0.5 μl改为1.5 μl 退火温度由54度改为50度，目的条带扩增效率很好，但是有很多非特异性扩增，请虫友指点，小虫不甚感激！先谢谢各位了！ [ Last edited by bear0329 on 2011-6-15 at 21:35 ] |
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brightfuture01
木虫之王 (文坛精英)
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2楼2011-06-15 22:14:35