| 查看: 3468 | 回复: 14 | ||||
| 本帖产生 2 个 MicEPI ，点击这里进行查看 | ||||
[求助]
丝状真菌提取总DNA问题
|
||||
|
CTAB法提取真菌DNA最后用异丙醇沉淀后使用无菌水无法完全溶解沉淀，这事怎么回事？ [ Last edited by cclday on 2011-6-14 at 08:39 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
299求调剂
已经有5人回复
-
收复试调剂生
已经有3人回复
-
280求调剂
已经有7人回复
-
环境领域全国重点实验室招收博士1-2名
已经有5人回复
-
303求调剂
已经有6人回复
-
290求调剂
已经有10人回复
-
0703化学求调剂 总分331
已经有3人回复
-
一志愿天津大学化学工艺专业（081702）315分求调剂
已经有8人回复
-
0703化学调剂
已经有3人回复
-
材料，纺织，生物（0856、0710），化学招生啦
已经有9人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 提取丝状真菌DNA
已经有16人回复
- 真菌基因组提取
已经有6人回复
- DNA试剂盒提取完DNA后的问题
已经有17人回复
- 真菌菌丝体提取DNA问题
已经有10人回复
- CTAB法提取真菌DNA的求助
已经有4人回复
- 一株芽孢杆菌的DNA提取问题
已经有6人回复
- 真菌DNA提取测序的一些问题
已经有5人回复
- 关于提取真菌DNA的方法
已经有9人回复
- SDS 提取液如何配置
已经有7人回复
- 关于DNA提取的一些问题
已经有13人回复
- DNA 3' 5'问题
已经有5人回复
- 在用液氮研磨样品提取DNA时，最需要注意什么问题？
已经有5人回复
- 请教：这个可能是什么丝状真菌
已经有9人回复
- 真菌基因组DAN提取图片，求高人指点
已经有20人回复
- 第一次使用Trizol提取DNA
已经有4人回复
- 为什么DNA提取总降解
已经有15人回复
- 丝状真菌的基因敲除
已经有7人回复
- 【求助/交流】提取真菌DNA或RNA一定要液氮研磨吗？
已经有7人回复
- 【求助/交流】提DNA，无水乙醇
已经有17人回复
- 【求助/交流】提取DNA总提不出来
已经有23人回复
冼亮淀粉酶
专家顾问 (知名作家)
生物大分子降解酶
-
专家经验: +248 - MicEPI: 114
- 应助: 257 (大学生)
- 贵宾: 0.272
- 金币: 19454.4
- 散金: 1704
- 红花: 121
- 帖子: 6586
- 在线: 2777.2小时
- 虫号: 856414
- 注册: 2009-09-25
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
- 管辖: 微生物
【答案】应助回帖
★ ★ ★
amisking(金币+3, EPI+1): 鼓励应助 2011-06-14 19:00:12
amisking(金币+3, EPI+1): 鼓励应助 2011-06-14 19:00:12
|
2.4.14.1真菌总DNA的提取 （1）接种菌株至液体培养基中，28℃，180rpm振荡培养3天； （2）用灭菌纱布过滤，并压干菌体； （3）将菌丝体倒入研钵（灭菌并预冷），迅速倒入液氮，研磨至粉末状； （4）将粉末移至1.5mL的EP管中，加入600µL真菌提取液； （5）加等体积苯酚/氯仿，轻轻倒转混合，10000rpm离心10min； （6）取400µL上清液移入新的1.5mlLEP管，重复步骤（5）； （7）取上清液，加入两倍体积无水乙醇，-20℃放置30min； （8）10000rpm 离心10min，75%乙醇洗沉淀2次，真空干燥； （9）以20µL 1×TE 溶解沉淀； （10）电泳检测总DNA的浓度。 （5）DNA抽提液的配置 表 2.5 DNA抽提液的配置 成分 浓度 NaCl 200mmol/L EDTA-Na2 4mmol/L SDS 2% Tris-HCl(pH=8.0) 100mmol/L |
5楼2011-06-14 17:09:56
疯狂修行者
木虫 (正式写手)
- MicEPI: 3
- 应助: 6 (幼儿园)
- 金币: 3121.2
- 散金: 753
- 红花: 8
- 帖子: 721
- 在线: 111.2小时
- 虫号: 332393
- 注册: 2007-03-26
- 性别: GG
- 专业: 农业昆虫学
2楼2011-06-14 08:53:24
3楼2011-06-14 09:01:25
fungixx
至尊木虫 (文坛精英)
- MicEPI: 2
- 应助: 37 (小学生)
- 贵宾: 3.458
- 金币: 19627.6
- 散金: 18645
- 红花: 118
- 沙发: 273
- 帖子: 13324
- 在线: 2030.7小时
- 虫号: 860534
- 注册: 2009-09-30
- 专业: 抗肿瘤药物药理
4楼2011-06-14 15:11:53
冼亮淀粉酶
专家顾问 (知名作家)
生物大分子降解酶
-
专家经验: +248 - MicEPI: 114
- 应助: 257 (大学生)
- 贵宾: 0.272
- 金币: 19454.4
- 散金: 1704
- 红花: 121
- 帖子: 6586
- 在线: 2777.2小时
- 虫号: 856414
- 注册: 2009-09-25
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
- 管辖: 微生物
6楼2011-06-14 17:11:22
张晓梅ZXM
金虫 (正式写手)
meimeizhang
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 5321.6
- 散金: 22
- 红花: 2
- 帖子: 420
- 在线: 147.3小时
- 虫号: 848646
- 注册: 2009-09-15
- 性别: MM
- 专业: 微生物资源与分类学
7楼2011-06-14 18:50:34
8楼2011-06-15 08:20:29
liuyu_sdili
木虫 (正式写手)
- MicEPI: 1
- 应助: 53 (初中生)
- 金币: 3045.9
- 散金: 15
- 红花: 2
- 帖子: 394
- 在线: 311.7小时
- 虫号: 1130112
- 注册: 2010-10-23
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
9楼2011-06-15 16:40:43
冼亮淀粉酶
专家顾问 (知名作家)
生物大分子降解酶
-
专家经验: +248 - MicEPI: 114
- 应助: 257 (大学生)
- 贵宾: 0.272
- 金币: 19454.4
- 散金: 1704
- 红花: 121
- 帖子: 6586
- 在线: 2777.2小时
- 虫号: 856414
- 注册: 2009-09-25
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
- 管辖: 微生物
|
我对这个方法不了解，第一次听说，所以就查了一下，不敢说我查到的东西是真的或者是最好的，就说一下我的想法：这个方法太浪费时间了，单单是破碎细胞就要保温一个小时！而且操作也不比我用的方法简单，试剂也不省，实在不适合我用，但不是说不适合别人用。这些也只是我的想法，别人怎么看我就不知道了。 http://www.ceps.com.tw/ec/ecjnlarticleView.aspx?atliid=435190 |
10楼2011-06-15 17:03:09
