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疯狂修行者

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【答案】应助回帖

cclday(金币+5): 2011-06-14 09:01:37
amisking(EPI+1): 鼓励应助 2011-06-14 19:00:02

（1）可能是你干燥时间太长了，你可以放在65度下煮一下，或者把水先65度预热。
（2）也可能是你提取的DNA不纯，有杂质。

你可以试一下有尿素提取的方法，以前我用过，参考文献：
一种提取植物基因组DNA的方法改良尿素法
曹文波，郑璐璐，谢文海
(1．华中师范大学生命科学学院，武汉430079；2．广西玉林师范学院，广西玉林537000)

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戒骄戒躁，坦荡做人，平常心做事，享受生活之美！！

2楼2011-06-14 08:53:24

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【答案】应助回帖

★ ★ ★
amisking(金币+3, EPI+1): 鼓励应助 2011-06-14 19:00:12

2.4.14.1真菌总DNA的提取
（1）接种菌株至液体培养基中，28℃，180rpm振荡培养3天；
（2）用灭菌纱布过滤，并压干菌体；
（3）将菌丝体倒入研钵（灭菌并预冷），迅速倒入液氮，研磨至粉末状；
（4）将粉末移至1.5mL的EP管中，加入600µL真菌提取液；
（5）加等体积苯酚/氯仿，轻轻倒转混合，10000rpm离心10min；
（6）取400µL上清液移入新的1.5mlLEP管，重复步骤（5）；
（7）取上清液，加入两倍体积无水乙醇，-20℃放置30min；
（8）10000rpm 离心10min，75%乙醇洗沉淀2次，真空干燥；
（9）以20µL 1×TE 溶解沉淀；
（10）电泳检测总DNA的浓度。

（5）DNA抽提液的配置
表 2.5 DNA抽提液的配置
成分浓度
NaCl 200mmol/L
EDTA-Na2 4mmol/L
SDS 2%
Tris-HCl(pH=8.0) 100mmol/L

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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。

5楼2011-06-14 17:09:56

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