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cclday

银虫 (正式写手)

[求助] 丝状真菌提取总DNA问题

CTAB法提取真菌DNA最后用异丙醇沉淀后使用无菌水无法完全溶解沉淀,这事怎么回事?

[ Last edited by cclday on 2011-6-14 at 08:39 ]
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

引用回帖:
Originally posted by liuyu_sdili at 2011-06-15 16:40:43:
我也要做真菌方面的课题,不知道氯化苄法行不行,请指教~~~~

我对这个方法不了解,第一次听说,所以就查了一下,不敢说我查到的东西是真的或者是最好的,就说一下我的想法:这个方法太浪费时间了,单单是破碎细胞就要保温一个小时!而且操作也不比我用的方法简单,试剂也不省,实在不适合我用,但不是说不适合别人用。这些也只是我的想法,别人怎么看我就不知道了。

http://www.ceps.com.tw/ec/ecjnlarticleView.aspx?atliid=435190
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
10楼2011-06-15 17:03:09
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疯狂修行者

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

cclday(金币+5): 2011-06-14 09:01:37
amisking(EPI+1): 鼓励应助 2011-06-14 19:00:02
(1)可能是你干燥时间太长了,你可以放在65度下煮一下,或者把水先65度预热。
(2)也可能是你提取的DNA不纯,有杂质。

你可以试一下有尿素提取的方法,以前我用过,参考文献:
一种提取植物基因组DNA的方法 改良尿素法
曹文波 ,郑璐璐 ,谢文海
(1.华中师范大学生命科学学院,武汉430079;2.广西玉林师范学院,广西玉林537000)
戒骄戒躁,坦荡做人,平常心做事,享受生活之美!!
2楼2011-06-14 08:53:24
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cclday

银虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 疯狂修行者 at 2011-06-14 08:53:24:
(1)可能是你干燥时间太长了,你可以放在65度下煮一下,或者把水先65度预热。
(2)也可能是你提取的DNA不纯,有杂质。

你可以试一下有尿素提取的方法,以前我用过,参考文献:
一种提取植物基因组DNA的方法 ...

按照你方法1我先试试。谢谢了
3楼2011-06-14 09:01:25
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

cclday(金币+5): 2011-06-14 17:08:29
应该是蛋白质没有除尽的  多抽提几次~
几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
4楼2011-06-14 15:11:53
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