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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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cclday

银虫 (正式写手)

[求助] 丝状真菌提取总DNA问题

CTAB法提取真菌DNA最后用异丙醇沉淀后使用无菌水无法完全溶解沉淀,这事怎么回事?

[ Last edited by cclday on 2011-6-14 at 08:39 ]
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liuyu_sdili

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-06-14 17:09:56:
2.4.14.1真菌总DNA的提取
(1)接种菌株至液体培养基中,28℃,180rpm振荡培养3天;
(2)用灭菌纱布过滤,并压干菌体;
(3)将菌丝体倒入研钵(灭菌并预冷),迅速倒入液氮,研磨至粉末状;
(4)将粉末移至 ...

我也要做真菌方面的课题,不知道氯化苄法行不行,请指教~~~~
9楼2011-06-15 16:40:43
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疯狂修行者

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

cclday(金币+5): 2011-06-14 09:01:37
amisking(EPI+1): 鼓励应助 2011-06-14 19:00:02
(1)可能是你干燥时间太长了,你可以放在65度下煮一下,或者把水先65度预热。
(2)也可能是你提取的DNA不纯,有杂质。

你可以试一下有尿素提取的方法,以前我用过,参考文献:
一种提取植物基因组DNA的方法 改良尿素法
曹文波 ,郑璐璐 ,谢文海
(1.华中师范大学生命科学学院,武汉430079;2.广西玉林师范学院,广西玉林537000)
戒骄戒躁,坦荡做人,平常心做事,享受生活之美!!
2楼2011-06-14 08:53:24
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cclday

银虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 疯狂修行者 at 2011-06-14 08:53:24:
(1)可能是你干燥时间太长了,你可以放在65度下煮一下,或者把水先65度预热。
(2)也可能是你提取的DNA不纯,有杂质。

你可以试一下有尿素提取的方法,以前我用过,参考文献:
一种提取植物基因组DNA的方法 ...

按照你方法1我先试试。谢谢了
3楼2011-06-14 09:01:25
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

cclday(金币+5): 2011-06-14 17:08:29
应该是蛋白质没有除尽的  多抽提几次~
几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
4楼2011-06-14 15:11:53
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