| 查看: 1571 | 回复: 8 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
融合蛋白在大肠杆菌中的表达，怎么被我越做越复杂了？已有5人参与
|
|||
|
刚入手做分子克隆的东西，导师给了个蛋白原核表达的实验，练练手。 主要就是找个蛋白的序列，连接到PET21中，在大肠杆菌表达体系中进行表达，并且用His-tag进行纯化。全序列都是公司合成的，并且还帮我连到了pet21上。第一次老师带着做的，第二次自己做的，纯化后得到的结果也不错。可是后来自己又表达了几次，都挂不上镍住了。再后来，做着做着，蛋白竟然不表达了，感觉特别匪夷所思。不过每次都是可溶表达，我还是挺有安慰的。大家有没有碰到类似的情况啊，求建议。 是不是我的原理没有搞清楚，但是感觉都是按照分子克隆上的操作进行的，而且每次自己不确定的都会问老师的。这个实验都做了半年了，越做越沮丧，蛋白的后续功能实验都还没进行呢。而且实验还是借别人的实验室做的，我都不好意思了。 哎，什么时候能看到希望呢，过来人给点鼓励吧。 |
回复此楼» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有124人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
请教大肠杆菌中蛋白表达后该如何处理
已经有7人回复- 【求助/交流】蛋白表达，大肠杆菌总是死。。。
已经有27人回复
- 【求助/交流】提取大肠杆菌中异源表达的蛋白用什么方法
已经有6人回复
- 【求助/交流】大肠杆菌中的可溶性表达
已经有5人回复
- 【求助/交流】大肠杆菌越摇越清，怎么回事
已经有19人回复
- 【求助/交流】大肠杆菌表达，蛋白可溶但无酶活，如何解决
已经有9人回复
- 【求助/交流】各位大侠，我的目的蛋白没有专门的抗体，如何检测它在大肠杆菌中的表达?
已经有14人回复
- 【求助/交流】大肠杆菌中蛋白表达量偏低，大家有什么建议？
已经有28人回复
- 【求助/交流】大肠杆菌表达的目的蛋白没活性，可以考虑换什么表达载体？
已经有7人回复
- 【求助/交流】大肠杆菌表达，有蛋白无酶活，如何解决
已经有5人回复
- 【求助/交流】关于大肠杆菌中蛋白表达的问题
已经有9人回复
- 【求助/交流】蛋白酶在大肠杆菌表达在牛奶平板上有透明圈，液体诱导却无酶活
已经有5人回复
- 【求助/交流】大肠杆菌表达系统蛋白酶对目的蛋白的水解问题
已经有11人回复
8楼2011-05-26 20:05:05
2楼2011-05-11 11:37:27
3楼2011-05-11 12:59:02
如来神掌
捐助贵宾 (著名写手)
- 应助: 12 (小学生)
- 金币: 5839.3
- 散金: 501
- 红花: 7
- 帖子: 2298
- 在线: 121.1小时
- 虫号: 458960
- 注册: 2007-11-13
- 专业: 植物保护生物技术
4楼2011-05-11 17:26:37