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zhaoxinrui0511

金虫 (小有名气)

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[求助] 克隆基因和载体连接后转化至大肠杆菌，为什么每次涂板都是空平板没有菌落？

小弟快崩溃了，请大家帮帮忙：
目的基因经PCR扩增后（引物上分别加入：Nco I和Xba I酶切位点）和T载体相连，经测序验证序列唔错，之后从T载体上用Nco I和Xba I双酶切重新获得了目的基因（酶切产物的纯化采用宝生物的胶回收），同时将可以在大肠杆菌中复制存在的乳酸菌载体pNZ8148用Nco I和Xba I双酶切（酶切产物的纯化采用宝生物的胶回收），按载体：目的片段（1：4）连接后转化至大肠杆菌，为什么每次涂板都是空平板没有菌落？（但我直接转化pNZ8148空载体每次都可以张很多菌落）。
小弟着急毕业，请各位大哥帮帮忙吧。

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1楼2011-04-24 18:42:36

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damaomao

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

12楼2012-05-12 10:35:25

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