| 查看: 2293 | 回复: 5 | ||
waldenpond金虫 (著名写手)
|
[求助]
PCR后凝胶电泳条带时有时无是怎么回事？
|
|
我上个月底做了一次RT-PCR（逆转录半定量），做完之后跑了一次凝胶电泳，结果还凑合。 这两天我又将提的RNA逆转录，PCR，跑电泳，却发现其中几个条带没有了（有几条很暗，有几条就直接没有）。连续逆转录、PCR了两次，结果都是如此。 其中有4条是内参照（β-actin），却只有两条是正常的，其余两条看着条带很暗，几乎没有，内参照应该是恒量表达的，条带无论何时应该是同样亮度，而且比较亮的。 还有4条是目的条带。这4条条带之前一次PCR还是有的，亮度也还可以，但是这一次却只有一条有，其余几条也是很暗，几乎看不出来。 我想了又想，就是找不出是什么原因。1.凝胶电泳加样的问题应该可以排除，因为今天我跑了两次结果都是这样，加样应该不存在问题的。2.样本的问题也应该可以排除，因为上一次可以做出来。3.逆转录、PCR（所加引物和体系）的问题，好像不是，因为我连续做了两次都出现了同样的问题。 各位大侠帮忙看一下到底是什么问题啊。先谢谢了！  PS：电泳图片是我用画图画出来的，大体可以表示我的问题，各位大侠凑合着看吧，呵呵！  [ Last edited by waldenpond on 2011-4-20 at 08:51 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有258人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有7人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 最近跑了几个DGGE，出现一些问题，请教大家
已经有11人回复
- PCR电泳，加样孔很亮，但目的条带却很淡，不知道怎么回事？
已经有24人回复
- 3‘RACE inner PCR 电泳结果总是有弥散现象回收条带不成带状什么原因啊？
已经有17人回复
- 胶回收产物连接转化后菌液PCR电泳条带出现问题
已经有8人回复
- 琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物出现杂带
已经有16人回复
- PCR后电泳条带异常
已经有10人回复
- 【求助/交流】琼脂糖凝胶电泳条带呈梳子形是怎么回事
已经有8人回复
- 【求助/交流】pcr结果电泳条带很淡
已经有14人回复
- 【求助/交流】目的基因PCR后电泳出现多条带
已经有7人回复
- 【求助/交流】PCR后电泳出现两条带是怎么回事？
已经有10人回复
- 【求助/交流】DGGE 胶回收后做PCR没有条带是怎么回事？？急！！！
已经有36人回复
- 【求助/交流】PCR引物设计出来了，但酶切之后电泳没条带啊
已经有18人回复
yuxia82012
木虫 (著名写手)
- MolEPI: 3
- 应助: 20 (小学生)
- 金币: 4980
- 散金: 2225
- 红花: 2
- 帖子: 1340
- 在线: 426.5小时
- 虫号: 781881
- 注册: 2009-05-29
- 性别: GG
- 专业: 有机合成
2楼2011-04-20 16:32:25
waldenpond
金虫 (著名写手)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 51.9
- 散金: 2167
- 红花: 14
- 帖子: 2607
- 在线: 154.3小时
- 虫号: 986777
- 注册: 2010-04-01
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
3楼2011-04-20 16:56:37
西瓜
荣誉版主 (知名作家)
- MolEPI: 50
- 应助: 94 (初中生)
- 贵宾: 3.157
- 金币: 1849.6
- 散金: 11458
- 红花: 116
- 沙发: 21
- 帖子: 7553
- 在线: 1449.5小时
- 虫号: 271749
- 注册: 2006-08-13
- 性别: GG
- 专业: 细胞衰老
- 管辖: 分子生物
4楼2011-04-20 17:14:29
5楼2012-07-21 21:32:40
乌和尚
木虫 (小有名气)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 3193.2
- 散金: 24
- 红花: 1
- 帖子: 235
- 在线: 24.1小时
- 虫号: 1910272
- 注册: 2012-07-25
- 专业: 细胞生物学研究中的新方法
6楼2014-01-29 22:26:23
