| 查看: 8318 | 回复: 6 | ||||
| 本帖产生 1 个 BioEPI ，点击这里进行查看 | ||||
[交流]
【求助】蛋白变性后为什么还要煮？？ 已有6人参与
|
||||
|
师姐的做法：蛋白加入loading buffer煮沸变性，放置-20保存，上样前取出再煮沸2分钟离心。 请问为什么变性后的蛋白要再煮沸啊？？多煮次会对蛋白有影响么？不煮的话能直接上样么？从-20取出需放置冰上化解么？？？ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 博后申请 |
» 猜你喜欢
上海工程技术大学张培磊教授团队招收博士生
已经有3人回复
-
上海工程技术大学【激光智能制造】课题组招收硕士
已经有5人回复
-
求助院士们，这个如何合成呀
已经有4人回复
-
临港实验室与上科大联培博士招生1名
已经有9人回复
-
想换工作。大多数高校都是 评职称时 认可5年内在原单位取得的成果吗？
已经有7人回复
-
需要合成515-64-0，50g，能接单的留言
已经有4人回复
-
自荐读博
已经有4人回复
-
写了一篇“相变储能技术在冷库中应用”的论文，论文内容以实验为主，投什么期刊合适？
已经有6人回复
-
带资进组求博导收留
已经有10人回复
-
最近几年招的学生写论文不引自己组发的文章
已经有11人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 乙醇使蛋白变性后可否复性？该如何让酶复性？
已经有3人回复
- 关于组织蛋白变性后的半凝固沉淀！！急
已经有4人回复
- 蛋白变性后极性的变化
已经有5人回复
- 大豆蛋白的变性温度是多少？
已经有15人回复
- 菜鸟求助，我们在提取蛋白的时候有变性裂解液和非变性裂解液，他们有什么区别
已经有4人回复
- DSC测定蛋白变性温度
已经有3人回复
- 变性后的蛋白质易被微生物利用吗
已经有5人回复
- 蛋白质 热变性 的原理是什么呢
已经有5人回复
- 乳清蛋白变性后还具有乳化性吗？
已经有9人回复
- 一种比较详细的PCR技术
已经有10人回复
- 怎么样表征蛋白质是否变性？
已经有4人回复
- sds-page蛋白样变性后仍会降解？
已经有8人回复
- 乳液法包裹蛋白质，超声不会让蛋白变性吗
已经有6人回复
- 胶原蛋白的变性温度
已经有10人回复
- 请教大家关于蛋白变性的问题
已经有6人回复
- 想问下关于蛋白变性的问题
已经有3人回复
- 蛋白分离纯化的纯品 带盐放-20度会变性吗？
已经有22人回复
- SDS-PAGE电泳蛋白质变性
已经有7人回复
- 血红蛋白容易变性吗
已经有7人回复
- 样品与SDS煮沸后的样品冰箱冷藏能保存多久？这样的变性样品在期间会降解吗？
已经有8人回复
- 【求助】蛋白酶对变性蛋白质有作用吗？
已经有7人回复
- 【求助/交流】蛋白样品加热煮过和不煮，SDS-PAGE结果差异显著，这是为何？
已经有20人回复
- 【求助/交流】蛋白质变性
已经有8人回复
- 【求助/交流】western blot中，蛋白经SDSPAGE后不是变性了吗，怎么还能和一抗结合？
已经有13人回复
314300420
捐助贵宾 (著名写手)
- BioEPI: 3
- 应助: 16 (小学生)
- 金币: 2193.1
- 散金: 2458
- 红花: 17
- 帖子: 1447
- 在线: 511.5小时
- 虫号: 851254
- 注册: 2009-09-18
- 性别: GG
- 专业: 抗体工程学
2楼2011-04-11 18:01:53
三磷酸腺苷
铁杆木虫 (职业作家)
- BioEPI: 3
- 应助: 1 (幼儿园)
- 贵宾: 0.021
- 金币: 7298.5
- 散金: 9
- 红花: 13
- 帖子: 4032
- 在线: 224.7小时
- 虫号: 551611
- 注册: 2008-04-27
- 性别: GG
- 专业: 神经系统肿瘤（含特殊感受
3楼2011-04-11 19:33:19
leiking
木虫 (正式写手)
中医药
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 6171.2
- 散金: 13
- 红花: 1
- 帖子: 711
- 在线: 135.5小时
- 虫号: 514859
- 注册: 2008-02-29
- 性别: GG
- 专业: 白血病
4楼2011-04-11 19:46:37
jurkat.1640
至尊木虫 (文坛精英)
- BioEPI: 2
- 应助: 905 (博后)
- 金币: 16527
- 散金: 1654
- 红花: 120
- 沙发: 41
- 帖子: 14453
- 在线: 2171.1小时
- 虫号: 514340
- 注册: 2008-02-28
- 性别: GG
- 专业: 病毒学
5楼2011-04-12 12:58:35
HarveyWang
捐助贵宾 (知名作家)
海外行者
- BioEPI: 14
- 应助: 80 (初中生)
- 金币: 2277.2
- 散金: 24
- 红花: 65
- 帖子: 6880
- 在线: 946小时
- 虫号: 528557
- 注册: 2008-03-19
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
silicare(金币+3, EPI+1): 经验之谈 2011-04-12 13:49:32
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
silicare(金币+3, EPI+1): 经验之谈 2011-04-12 13:49:32
|
蛋白样品加 loading buffer 煮3-5min， 最好立即就上样。 如果不立即上样，一定要-20℃以下立即保存，否则电泳出来的蛋白条带就会变浅，变模糊。 样品在-20摄氏度以下 拿出来的，室温几分钟即化开，混匀，立即上样即可。 不用反复煮。 反复煮也会使得蛋白条带变浅，变模糊。 我都是-20℃以细胞形式保存蛋白，经验发现，这比加 loading buffer 煮的样品保存效果更好。 总之，就是煮了就上样最好！不上样就不煮，直接冷冻保存。 |
6楼2011-04-12 13:08:52
7楼2015-03-25 10:15:13