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菠萝蜜123

新虫 (小有名气)

[求助] 想问下关于蛋白变性的问题

是这样 想问下大家  我新鲜制备的蛋白溶液  因为里面加了PMSF和苯基硫脲的晶体，想让其在溶液混匀，所以想放在混匀器上混匀  这样的话蛋白由于剧烈震荡会变性吗？ 另外我做蛋白的考马斯亮蓝反应（比色皿比色），如果蛋白变性了 还能做吗？
谢谢大家帮帮忙！
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1楼2011-11-22 22:20:57
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浩然103

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
西瓜(金币+1): 鼓励应助 2011-11-23 17:44:49
蛋白质会变性，应该不影响吧，考马斯亮蓝法本来会使蛋白质变性。
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2楼2011-11-22 22:35:39
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菠萝蜜123

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 浩然103 at 2011-11-22 22:35:39:
蛋白质会变性，应该不影响吧，考马斯亮蓝法本来会使蛋白质变性。

谢谢回复！我想再请教一下 在缓冲液里加上PMSF抑制丝氨酸蛋白酶和巯基蛋白酶，具体的目的是什么呢？
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3楼2011-11-23 22:16:48
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份子

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

丝氨酸蛋白酶是一个蛋白酶家族，它们的作用是断裂大分子蛋白质中的肽键，使之成为小分子蛋白质。巯基蛋白酶，依靠巯基催化水解肽键的蛋白水解酶。 总之，这两种酶对蛋白质的降解有影响
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自己的和大家的
4楼2011-11-23 22:33:32
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