24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 3352  |  回复: 15
本帖产生 1 个 MicEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

camel315

金虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】土壤总DNA的离心柱纯化问题

目前我在手工提取土壤总DNA的时候,需要用离心柱纯化DNA。DNA粗提液的OD260含量比较低,但230nm的杂质较多。我用Mobio公司的试剂盒就不存在这个问题,他们的离心柱的材质可能比较好,可以有效除去粗提液中的各种杂质。国内商用的纯化试剂盒一般只对PCR产物(或者说片段<10kb)的核酸比较有效,而对基因组DNA的纯化效率比较低(<50%,甚至<30%).各位虫友,有谁用过成熟的(硅胶或者树脂)离心柱,可以有效除杂(主要是腐殖酸和盐类)?不妨给点建议。
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

土壤微生物

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
scelab(金币+5, EPI+1): 谢谢热心回复~ 2011-04-20 23:00:11
camel315(金币+2): 2011-05-30 09:26:54
如果不偷懒,可以用两天时间获得无腐殖酸无盐的DNA。

堆肥中提取得到的腐殖酸比平常花园土之类的高几十倍,但腐殖酸一样能除去。腐殖酸的分子量很大,( http://wenku.baidu.com/view/dad59a274b35eefdc8d33303.html    http://cdmd.cnki.com.cn/Article/CDMD-10141-2006067999.htm )只要过凝胶层析柱就能除去腐殖酸,脱盐也简单,用多几次70%乙醇洗就行。

可以看看庞浩的博士论文,文件太大传不上来。
利用宏基因组技术克隆和鉴定堆肥环境中的纤维素酶基因
http://d.g.wanfangdata.com.cn/Thesis_Y1600277.aspx

[ Last edited by 冼亮淀粉酶 on 2011-4-19 at 14:37 ]
8楼2011-04-19 14:32:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

mirror3895

铁杆木虫 (正式写手)


camel315(金币+1): 2011-07-07 09:39:32
我也想知道这个问题呢,期待高人的解答
2楼2011-04-11 11:20:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
wolfebst(金币+1): 谢谢您的参与 2011-04-11 12:24:39
camel315(金币+1): 2011-05-30 09:26:33
camel315(金币+1): 2011-07-07 09:39:19
你看看bioteke的这个多功能DNA试剂盒可以不?
http://www.bioteke.com/chn/showproduct.asp?id=176
3楼2011-04-11 11:49:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

camel315

金虫 (小有名气)


bioteke的试剂盒我问了,50次的1500元,价格还是非常高的,而且不提供试用装。跟mobio的power soil DNA isolation kit差不多了。其实是基于zhou(1996)方法,加入了离心柱除杂步骤。但是他的离心柱不单卖。
4楼2011-04-11 16:23:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 343求调剂 +8 王国帅 2026-04-10 8/400 2026-04-11 10:50 by qingpingzhu
[考研] 346,工科求调剂 +3 moser233 2026-04-09 3/150 2026-04-11 10:04 by zhq0425
[考研] 复试调剂 +9 积极向上; 2026-04-10 11/550 2026-04-11 09:25 by 猪会飞
[考研] 一志愿东北大学控制工程085406数二英二385,求调剂 +8 Ezra_Zhang 2026-04-09 8/400 2026-04-11 09:15 by 猪会飞
[考研] 调剂 化学 307 +21 73372112 2026-04-09 23/1150 2026-04-10 23:53 by wj165256
[考研] 289 分105500药学专硕求调剂(找B区学校) +6 白云123456789 2026-04-09 8/400 2026-04-10 21:13 by zhouxiaoyu
[考研] 求调剂 +5 不会飞的鱼@ 2026-04-10 5/250 2026-04-10 19:07 by chemisry
[考研] 085800 能源动力求调剂 +6 阿biu啊啊啊啊啊 2026-04-10 6/300 2026-04-10 15:03 by hemengdong
[考研] 求调剂希望还是希望在山河四省附近 +3 快乐的小白鸽 2026-04-05 3/150 2026-04-09 17:36 by wp06
[考研] 本科郑州大学,一志愿华东师范大学282求调剂 +23 熊哥xtk 2026-04-07 26/1300 2026-04-09 17:17 by 18446523
[考研] 368化学求调剂 +13 wwwwabcde 2026-04-07 14/700 2026-04-09 14:47 by heaven_jay
[考研] 一志愿0807 数一英一 313 有没有二轮调剂 +11 emokidd 2026-04-08 12/600 2026-04-09 09:24 by wyf236
[考研] 求调剂 +8 吃口冰激凌 2026-04-07 8/400 2026-04-09 08:03 by 5268321
[考研] 264求调剂 +11 麦小叮当 2026-04-07 11/550 2026-04-08 16:05 by 一只好果子?
[考研] 求调剂,现在还能填的 +3 上岸小莹加油 2026-04-08 3/150 2026-04-08 14:30 by zhq0425
[考研] 求调剂 一志愿西南交通大学085701环境工程 282分 +15 多多爱吃汉堡 2026-04-04 16/800 2026-04-08 11:39 by i_cooler
[考研] 265求调剂 +19 小木虫085600 2026-04-06 21/1050 2026-04-08 10:38 by 逆水乘风
[考研] 专硕085403,291分,有两篇专利,一国一奖 +3 哈吉咪哈吉咪 2026-04-07 3/150 2026-04-07 18:21 by 蓝云思雨
[考研] 求助 +3 卡卡东88 2026-04-06 4/200 2026-04-06 15:28 by going home
[考研] 328分调剂 +6 门men 2026-04-04 6/300 2026-04-05 13:40 by imissbao
信息提示
请填处理意见